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分析試劑盒配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 溫育:操作同3。 洗滌:操作同5。 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
儀器用水是使用好檢驗試劑的一個十分重要的環(huán)節(jié)之一。因為測定離子類項目:比如銅、鐵、鋅、鈣、鎂、磷。
這些項目在使用過程中,儀器用水的質(zhì)量相當(dāng)重要,雖然現(xiàn)在一般醫(yī)院的生化儀都有制水系統(tǒng),但制水系統(tǒng)基本都是制備去離子水,離子交換樹脂在使用一段時間后交換能力明顯下降,需要定期進(jìn)行更換,否則制備的水離子含量多,電導(dǎo)率偏高。使用含離子超標(biāo)的水沖洗儀器,直接影響檢驗結(jié)果。再如血氨、二氧化碳項目,如果水質(zhì)不好,儀器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,則檢驗該項目的結(jié)果也會受到嚴(yán)重的影響。
試劑吸樣和樣品吸樣不準(zhǔn)確,通常導(dǎo)致利用速率法測試的標(biāo)本系統(tǒng)偏低或偏高。眾所周知,速率法計算因子是由加樣體積和試劑體積參與確定的,如果加樣體積或加試劑體積不準(zhǔn),導(dǎo)致真正速率法計算因子和理論計算因子偏離,從而使測試結(jié)果不準(zhǔn)確。
解決辦法:a、定期進(jìn)行一期維護(hù)和保養(yǎng);b、按要求及時更換零部件;c;定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn);d;全自動生化分析標(biāo)本和試劑用量少,殘存少量即會影響測試結(jié)果,每天應(yīng)用無水乙醇擦洗并定期更換干燥棒,保證比色杯清洗后不留賤液,避免比色杯的交叉污染。
由于目前生產(chǎn)廠家提供的校準(zhǔn)液并非通用的,只使用于某一特定的分析系統(tǒng)。同一項目不同方法之間有很大差異,同一項目不同方法學(xué)的校準(zhǔn)液更不能混用,但是在臨床檢驗中經(jīng)常會發(fā)生膽紅素釩酸鹽法用重氮法的校準(zhǔn)液校準(zhǔn),乳酸脫氫酶L-P法用P-L法校準(zhǔn)液校準(zhǔn),TBA循環(huán)酶法用比色法校準(zhǔn)液校準(zhǔn)等都會造成測定結(jié)果不準(zhǔn)確。另外同一法方學(xué),不同廠家的校準(zhǔn)品和試劑都會有所差異。