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凋亡、及ai變以及通路表達,細胞信號傳導及基因表達的調(diào)控,細胞的分化及其調(diào)控機理,
都與細胞的力學特性有關,細胞組織力學不僅揭示正常生命機體生長、發(fā)育和衰老的機理和自然規(guī)律,
而且對于闡明機體疾病的發(fā)病機理及提供診斷和治1療的基本原理,包括新型和新技術的研發(fā),
都是具有極其重要的理論和現(xiàn)實意義.
RCCS轉壁式生物反應器在細胞增值技術中的應用!
細胞增殖檢測技術
目前主要有兩種用于檢測細胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過直接測定進行分裂
的細胞數(shù)來評價細胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細胞活力(cell viability)檢測方法,通過檢測樣品中健康細胞的數(shù)目來評價細胞的增殖能力。顯然,細胞活力檢測法并不能終證明檢測樣品中的細胞是否在增殖。如細胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動凋亡程序,但的干擾可抑制凋亡的發(fā)生;這時若采用細胞活力檢測法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細胞數(shù)量,但我們并不能從干擾組細胞數(shù)大于對照組的事實說明可促進細胞增殖的結論。所以直接的證據(jù)應該采用方法一。
其中常見檢測:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克X隆形成。
細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側,常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。還有細胞培養(yǎng)的溫度,和合適的氣體環(huán)境。細胞操作主要是無菌,一旦被什么都做不了。
⑴超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側流式,直流式和外流式三大類;
⑵無菌操作間:一般由更衣間,緩沖間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱,離心機,倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱,冷藏器及消毒好的無菌物品等;
⑶操作間:普通培養(yǎng)箱,離心機,水浴鍋,定時鐘,普通天平及日常分析處理物 ;
⑷洗刷消毒間:烤箱,消毒鍋,蒸餾水處理器及酸缸等.;
⑸分析間:顯微鏡,計算機及打印機等。
硬件是實驗成功的基礎,細胞培養(yǎng)的設備及環(huán)境,十分重要!
美國Synthecon賽斯康RCCS-2H微重力雙轉頭三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)
什么是傳代細胞培養(yǎng)?
原代細胞或細胞株或細胞系需在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的原代細胞或細胞株或細胞系或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù),這個過程體外培養(yǎng)稱為傳代細胞培養(yǎng)。一般認為,細胞培養(yǎng)形成單層匯合,細胞密度與生存空間有密切的關系,將培養(yǎng)細胞分散,以1:2或l:3或1:4以上的比率轉移分散進行培養(yǎng),即為傳代細胞培養(yǎng)。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)期和停止期。