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低溫生物菌種的篩選分離
篩選:工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩,挑選具有某種能力的有用菌種。
分離:首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品,用無菌水稀釋后,涂布于置有適宜細(xì)菌、霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上,并將其倒置于恒溫箱中,培養(yǎng)一定時間,平皿上長出的許多單個菌落(單一微生物的集落)經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株,簡稱純種,移種至試管斜面培養(yǎng)基上,置4℃冰箱備用。
篩選模型:根據(jù)不同的篩選目的,采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選菌種的方法是將土壤中分離所得的純種,在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后,用打孔器將菌塊移至含有試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基上,在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間后取出,如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈,則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗(yàn)菌生長的菌種物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵,測定發(fā)酵液或菌絲體內(nèi)菌種的含量,選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對所提取的菌種進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)等,確為有效者,即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上,恒溫培養(yǎng)一定時間,如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的,則該菌具有分解脂肪的能力,進(jìn)一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力,挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。
低溫生物菌種的作用
從18年開始,就對北京順義馬坡工業(yè)區(qū)污水廠(日處理2000噸))進(jìn)行微生物改良,經(jīng)菌種改良后,馬坡污水廠各項(xiàng)出水指標(biāo)均低于北京排放標(biāo)準(zhǔn),一直平穩(wěn)運(yùn)行,被順義環(huán)保局評為污水站。18年又連續(xù)對河北承德日處理5萬噸的污水廠和遼寧長嶺縣日處理2萬噸的污水廠進(jìn)行微生物改良,都取得了非常好的改良效果,冬季低溫氨氮指標(biāo)一直持續(xù)穩(wěn)定達(dá)標(biāo),平穩(wěn)運(yùn)行,沒有二次再補(bǔ)充過耐低溫生物菌種。
低溫生物菌種有哪些保藏法?
1、傳代培養(yǎng)保藏法:包括又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等,培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法:液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時間。
3、載體保藏法:載體保藏法是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法。
4、寄主保藏法:寄主保藏法用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物。
5、冷凍干燥保藏法:先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥),其中真空冷凍干燥法常見。