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組織研磨機的工作原理
組織研磨機是一款名副其實的實驗室多功能樣品制備儀器,是專門為“少量樣品”而推出的新產品。5)將研磨轉速調到1800,設定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調節(jié),此數(shù)據(jù)是以銀杏為樣本得出)。高通量組織研磨機可在1-3分鐘內對硬性、軟性、彈性等樣品進行快速有效的干磨或濕磨,亦可達到對粉體及混濁液混合、均相化的目的,還可以進行低溫液氮冷凍研磨,也可以進行生物細胞破碎和DNA/RNA提取。高通量組織研磨機可研磨的樣品種類包括:植物組織、動物組織、細胞、細菌、芽孢和酵母等。
組織研磨機的詳細介紹
以下內容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對同行業(yè)有所幫助!
組織研磨機具有對稱的一對高速大振幅的搖臂,研磨罐在水平方向上進行高頻鐘擺式振動,研磨球在慣性的帶動下以高能量反復撞擊及摩擦,從而達到粉碎研磨的效果。
研磨罐的運動是與罐內研磨球的運動進行疊加,將樣品充分混合。混合效果可以通過使用多個不同直徑的小研磨球來得到進一步的提高,高通量組織研磨機研磨時使用多個不同直徑的小研磨球可以大大提高樣品的均混度。組織研磨機的詳細介紹以下內容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對同行業(yè)有所幫助。生物細胞就可以通過使用大量小球(如瑪瑙球)進行細胞破壁。球與球之間的巨大撞擊和摩擦可有效地實現(xiàn)細胞的破壁。
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每50~100mg 組織加入0.2體積 TRIzol
1.加鋼球1顆,設置研磨儀參數(shù):12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,蓋緊管蓋,手動劇烈震搖15 秒鐘,然后室溫靜置2~3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相(無色)加入到新試管中,同時計算所吸取的水相體積。不必過多吸取,防止吸入DNA和蛋白雜質(中間層,白色)。
5. 加入所吸取水相等體積預冷的異丙淳,蓋緊管蓋,輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘,待RNA 充分沉淀(為減少RNA 降解,此步驟可省略)。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),每管加入0.2體積75%乙醇潤洗,蓋緊管蓋,輕輕晃動試管,以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),打開管蓋,將RNA 沉淀干燥(室溫揮發(fā)或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進一步實驗,或者-70℃保存。