酶底物法測(cè)定總大腸菌群的影響因素

環(huán)境因素的影響

對(duì)同一水樣在自然環(huán)境下與無(wú)菌室中分別進(jìn)行總大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測(cè)， 培養(yǎng)時(shí)間為 24 h，培養(yǎng)溫度為( 36 ± 1) ℃ ，水樣在自然環(huán)境下與無(wú)菌室內(nèi)總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測(cè)值相對(duì)偏差在 10% 以內(nèi)，樣品T檢驗(yàn)分析p＞0．05，監(jiān)測(cè)值差異不顯著，表明此方法對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否無(wú)菌沒(méi)有嚴(yán)格的要求。

程控定量封口機(jī)操作規(guī)程

1.將電源開(kāi)關(guān)及機(jī)身背后開(kāi)關(guān)打開(kāi)，橙黃色指示燈亮，儀器開(kāi)始加熱。

2.10-30分鐘（時(shí)間受環(huán)境溫度及工作條件等因素影響）后，預(yù)熱完成，綠色指示燈亮，儀器達(dá)到封口溫度可進(jìn)行封口操作。

3.把裝有樣品和Colitech試劑的定量盤放置在進(jìn)樣口。

4.向儀器方向輕輕推送定量盤，儀器感應(yīng)后會(huì)自動(dòng)進(jìn)樣，帶動(dòng)其進(jìn)入封口。

5.整個(gè)進(jìn)樣過(guò)程大概持續(xù)15秒。定量盤封口完成后，會(huì)從儀器后方送出，從后方拿取定量盤即可。

6.如果有多個(gè)定量盤待封口，可進(jìn)行連續(xù)封口，中間間隔十幾秒種即可。

7.如果遇到類似定量盤未放平就進(jìn)樣的狀況，可點(diǎn)擊反轉(zhuǎn)按鈕進(jìn)行儀器反轉(zhuǎn)。如果定量盤已完全進(jìn)入儀器，則不可進(jìn)行反轉(zhuǎn)操作。

8.使用完畢后，關(guān)閉儀器電源并拔下電源線。

食品大腸桿菌菌群檢測(cè)--MPN計(jì)數(shù)法

MPN（most probable number）法：即Z近似數(shù)法，也稱為Z可能數(shù)法，是食品檢驗(yàn)中常用的方法。1915年，McCrady第yi次發(fā)表了用MPN法 (Z大可能數(shù)法) 來(lái)估算細(xì)菌濃度的方法， 這是一種應(yīng)用概率理論來(lái)估算細(xì)菌濃度的方法。

MPN法：利用待測(cè)微生物的特殊生理功能的選擇性來(lái)擺脫其他微生物類群的干擾，并通過(guò)該生理功能的表現(xiàn)來(lái)判斷該類群微生物的存在和豐度。因?yàn)榧?xì)菌在樣本內(nèi)的分布是隨機(jī)的，所以檢測(cè)細(xì)菌時(shí)，可應(yīng)用概率理論計(jì)算菌數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以MPN值表示，但MPN值并不能表示實(shí)際菌落數(shù)， 實(shí)際菌落數(shù)有可能落在置信區(qū)間內(nèi)的任何一點(diǎn)，MPN值是落在這個(gè)置信區(qū)間內(nèi)概率Z大的一點(diǎn)。

什么是總大腸菌群?

總大腸菌群是指一群在37℃培養(yǎng)24小時(shí)和48小時(shí)后，能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌。它不是某一種或某一屬細(xì)菌，而是具有共同特性的一組細(xì)菌。

為什么要檢測(cè)飲用水中總大腸菌群?

天然水體中含有多種微生物，要判斷水質(zhì)中是否含有病原微生物、需檢測(cè)每一種病原微生物，由于種類多和檢測(cè)困難的原因，實(shí)際工作中很難做到。人和其它溫血?jiǎng)游铮缗?、羊、狗等的腸道存在大量的總大腸菌群，如果飲用水受到糞便污染時(shí)，容易在水體中檢測(cè)到，總大腸菌群的檢測(cè)方法也簡(jiǎn)單易行;并且總大腸菌群對(duì)消毒劑的抵抗力與其他腸道致病菌相似，消滅了總大腸菌群，可以認(rèn)為致病腸道細(xì)菌也已消滅。針對(duì)病原微生物的一些共同特征，就選取總大腸菌群為病原微生物的指示菌之一，水中總大腸菌群含量的多寡，可在一定程度上反映水質(zhì)受病原微生物污染的狀況，在水質(zhì)衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)具有重要意義。