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PCR實驗室的相關設置
要完成一組PCR實驗,通常需要經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增和產物分析4個實驗過程。
這4個實驗過程的實驗用房應相鄰布置,組成一個獨立的PCR實驗區(qū)。標準的PCR實驗區(qū)包括:試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、產物分析區(qū)、各區(qū)配套的緩沖區(qū)及公共走廊。
PCR實驗室整體平面布局某醫(yī)院PCR實驗室平面布局如圖1所示,整個區(qū)域有一個公用走廊,每個獨立實驗區(qū)設有專門的緩沖區(qū)。通過壓差控制,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,并且降低擴增產物對人員和環(huán)境的污染。
試劑準備區(qū)該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。
試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區(qū),不得經過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內,并在本區(qū)內制備成所需的貯存試劑。
試劑準備區(qū)配備有2~8°C冰箱和-80°C冰箱,計算冷負荷時,需要將它們計算在內。
房間的面積宜控制在15m2~20m2。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對正壓狀態(tài),以防止外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染。
標本制備區(qū)該區(qū)域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。
標本制備區(qū)配備有2~8°C冰箱和-20°C冰箱,計算冷負荷時,需要將它們計算在內。在標本制備區(qū),還需要配備生物安全柜,用于進行提取核酸的操作。
CR三區(qū)或四區(qū)的對應的每個緩沖間,全是做成正壓嗎?
A
是的,需要做成相對正壓
PCR實驗室的每間房間消防噴淋頭一樣要做到室內嗎?并且做成隱形噴淋頭嗎?
是的。根據建筑消防要求,PCR實驗室內必須配置噴淋頭,噴淋頭按照潔凈室內做法為暗噴淋,為保證實驗室內儀器的安全杜絕因煙感誤報和誤操作引起噴淋頭動作噴水。
Q
排風口的回風口和送風口是一個東西嗎?只是二者的氣流方向不一樣嗎?
排風口內的過濾器和送風口過濾器是一個系列產品,根據PCR實驗室內操作的實驗不同排風口選用過濾器或中效過濾器。
(2)嚴格把好材料質量控制關。
在PCR實驗室凈化施工前,首先要進行工程招工作,在實際工作當中,部分承包商獲取項目以后,為了節(jié)約費用,獲取更多的利益,在采購材料時,有些采購人員未能按照材料設計要求(包括品種、規(guī)格、技術要求)來優(yōu)選施工材料 ;與此同時,部分采購在材料采購工作中存在收取回扣的行為,選擇劣質的施工材料,這也是引發(fā)PCR實驗室凈化施工質量的原因之一。另外,部分管理企業(yè)在工程質量管理過程中,仍未能建立完善的管理機制,允許劣質的材料進入現場和使用,從而給工程施工質量和安全埋下一定的隱患。