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洋蔥亞細胞定位培養(yǎng)電話「在線咨詢」

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發(fā)布時間:2021-10-12 15:27  






武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;而基因的表達調(diào)控是在多級水平上參加的復(fù)雜事件,其中轉(zhuǎn)錄起始是基因表達的的調(diào)節(jié)環(huán)節(jié),翻譯以及翻譯后加工是基因表達的基本控制點。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





重金屬轉(zhuǎn)運蛋白P-type ATPase(HMA)已被證實參與植物體內(nèi)的重金屬運輸,HMA5主要參與銅的轉(zhuǎn)運。在模式植物擬南芥、水稻和黃瓜中對HMA5基因進行了較多的研究,但是對豆科植物HMA5的研究鮮見報道。實驗室前期在天藍苜蓿中分離到一個與銅脅迫及共生結(jié)瘤相關(guān)的HMA5基因,為了對此類基因在豆科植物共生結(jié)瘤中的作用進行深入研究,本研究對全基因組已測序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因組進行篩查,尋找HMA5同源基因并通過表達模式分析初步判斷其與共生結(jié)瘤的關(guān)系,在此基礎(chǔ)上,以其中的MTR_8g079250基因為對象,進行亞細胞定位、組織表達、RNA干擾和過量表達等研究,初步鑒定該基因在共生結(jié)瘤中的功能。本研究中,我們了這兩個EST片段所代表的基因,StRFP和StPUB,并研究了其生物學(xué)功能。1、MTR_8g079250的亞細胞定位構(gòu)建MTR_8g079250的洋蔥表皮亞細胞定位載體,通過基因槍轟擊轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細胞,在激光共聚焦顯微鏡下觀察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在細胞膜上表達,在細胞核上也有微量的表達;構(gòu)建MTR_8g079250的葉片亞細胞定位載體,通過根癌農(nóng)介導(dǎo)注射葉片的方式進行轉(zhuǎn)化,結(jié)果表明目的基因主要定位在細胞膜和細胞核上;2、MTR_8g079250的組織表達構(gòu)建PMTR_8g079250::GUS融合表達載體,通過農(nóng)發(fā)根轉(zhuǎn)化的方式轉(zhuǎn)入蒺藜苜蓿根部,經(jīng)培養(yǎng)后,進行GUS染色觀察。


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;序列分析表明OsSsr1的開放閱讀框為2004bp,編碼一個由667個氨基酸組成并含有5個跨膜區(qū)的蛋白,該蛋白N端含有一個信號肽。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。




柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞柑橘致病變種(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac)引起的一種病害,可影響大部分的商業(yè)柑橘栽培品種,造成嚴重的經(jīng)濟損失。選育抗病品種是解決該病害問題的根本途徑,其中,利用基因工程將抗病基因?qū)朐耘嗥贩N是解決柑橘病害的一條快速而有效的途徑。WRKY轉(zhuǎn)錄因子和病程相關(guān)蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs)在植物抗病信號調(diào)控途徑中起著重要作用。Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD酰基轉(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說明Bra1基因是BAHD?;D(zhuǎn)移酶基因家族的一個成員。本研究根據(jù)柑橘潰瘍病高感品種紐荷爾臍橙(Citrus sinensis(L.)Osbeck)和高抗品種四季橘(Citrus madurensis)受潰瘍病侵染后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),篩選了在這兩個品種中表達差異顯著的24個WRKY和4個PR基因進行研究,在此基礎(chǔ)上,詳細研究了4個WRKY基因和2個PR1基因在柑橘潰瘍病抗性中的功能和作用。具體研究結(jié)果如下:1.候選基因的和生物信息學(xué)分析了Cs WRKY22、Cs WRKY50、Cs WRKY72-1、Cs WRKY72-2、和Cs PR1-1、Cs PR1-2的編碼序列,ORF分別為921bp、480bp、1809bp、1767bp、501bp和480bp。用MEGA5.2軟件分析其與其他植物同家族蛋白氨基酸序列的親緣關(guān)系,并構(gòu)建進化樹。發(fā)現(xiàn)Cs WRKY22與可可WRKY29,Cs WRKY50與棗WRKY50,Cs WRKY72與可可WRKY72,Cs PR1-1與可可PR-1,Cs PR1-2與龍眼PR-1的親緣關(guān)系較近。


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;甘蔗是的糖料作物,甘蔗黑穗病已成為世界性甘蔗主要病害,也是我國甘蔗栽培上嚴重的真菌病害,挖掘甘蔗自身抗病基因?qū)共∮N有重要意義。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。




蘿卜(Raphanus sativus L.)是一種重要的十字花科根菜類作物,具有較高的營養(yǎng)價值,在中國乃至世界都有廣泛種植。葡萄糖苷是一種重要的植物次生代謝產(chǎn)物,主要存在于蘿卜等十字花科植物中。硫苷及其降解產(chǎn)物在植物防御、風味形成以及人類預(yù)防中起重要的作用,此外,它還具有作為生物的潛力。磷(Phosphorus,P)是植物生長發(fā)育必需的大量營養(yǎng)元素之一,廣泛地參與到植物體內(nèi)的能量轉(zhuǎn)移、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、光合作用等過程。MYB轉(zhuǎn)錄因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成過程中的關(guān)鍵調(diào)控基因,其表達量的多少直接影響蘿卜中硫苷的含量和分布。調(diào)控基因的某些特性在擬南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有廣泛研究,然而在蘿卜研究領(lǐng)域關(guān)于MYB28和MYB29的分子特性、表達特征尚未見報道。因此,本以蘿卜品種'NAU-ZQH'為材料,通過比對擬南芥中MYB28和MYB29的序列與本實驗室蘿卜轉(zhuǎn)錄組序列,蘿卜中調(diào)控硫苷合成的兩個關(guān)鍵基因RsMYB28和RsMYB29,之后從亞細胞定位、轉(zhuǎn)錄活性和表達特征等多方面進行研究,以期,增加對蘿卜中RsMYB28和RsMYB29基因分子特性和表達特征的認識,為后期通過基因改良培育出硫苷含量較高的蘿卜新品種提供理論基礎(chǔ)。


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;方法構(gòu)建2種GFP標簽蛋白質(zhì)表達載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點,以目的基因。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





采用根癌農(nóng)介導(dǎo)的方法,以農(nóng)介導(dǎo)絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化的載體PCH-sGFP對尖孢鐮刀菌甘藍?;蛢蓚€生理小種進行轉(zhuǎn)化,該載體含有報告基因—綠色熒光蛋白基因(gfp)和篩選基因—潮磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(hph).獲得轉(zhuǎn)化菌株后,經(jīng)檢測表明:T-DNA目的片段成功整合到枯萎病菌基因組中,并且單孢繼代培養(yǎng)6代后熒光蛋白仍能穩(wěn)定遺傳.對轉(zhuǎn)化菌株的生長速度和致病力進行分析,結(jié)果表明:菌株和轉(zhuǎn)化菌株在生長速度和致病力上沒有顯著差異.因此,轉(zhuǎn)化菌株可用于甘藍枯萎病菌的組織病理學(xué)研究.


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