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pcr實驗室建立方法:
樣品準(zhǔn)備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題,反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報道。
建立前PCR區(qū)。該去專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng),這個區(qū)域必須保持干凈,而且沒有來自粘貼和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備,特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
山西東勝科星實驗室設(shè)備有限公司專業(yè)從事:PCR實驗室、潔凈室、無菌室、實驗室家具、實驗室凈化工程設(shè)計、生產(chǎn)、銷售、安裝和售后為一體的專業(yè)化公司。
凈化實驗室除了解決空氣凈化的問題以外,還要盡可能多的為實驗工作提供方便,因此在設(shè)計上應(yīng)考慮一些必備的實驗室用器具。
1、互鎖式傳遞窗:在P2實驗室配有兩個傳遞窗。保證了實驗室物流的安全性?;ユi式傳遞窗內(nèi)有紫外線燈,當(dāng)污染過物品拿出實驗室前進行消毒.互鎖式傳遞窗還保證了室外和室內(nèi)空氣的隔絕,方便了實驗人員的物品傳遞,減少了實驗人員進出實驗室的次數(shù).傳遞窗室內(nèi)室外都可控制。
2、自動閉門器:根據(jù)國家規(guī)范要求,在潔凈實驗室門上安裝有自動閉門器。
PCR實驗室規(guī)范的操作
(1)擴增檢驗實驗室的技術(shù)人員必須進行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作;
(2)在實驗操作過程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施;
(3)清潔工作及時、正確。實驗工作結(jié)束后,必須立即對本區(qū)進行清潔。除常規(guī)的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對一些實驗設(shè)備還應(yīng)進行高壓消毒處理。
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PCR實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
PCR試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。
對與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。