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1.刺激的和非刺激的細(xì)胞裂解液
2.蛋白酶抑l制劑
3. 4°C管搖桿或搖床
4. 0.5 M EDTA,pH8.0
5. 1 M氯化鎂
6. 2倍還原SDS-PAGE樣品緩沖液
7.電泳和免l疫印跡系統(tǒng)
8.免l疫印跡洗滌緩沖液,例如TBST(10 mM Tris-HCl,pH 7.4,0.15 M NaCl,0.05%
吐溫20)
9.免l疫印跡封閉緩沖液(TBST包含5%脫脂奶粉或3%BSA)
10. PVDF或硝l酸纖維素膜
11.二抗
12. ECL檢測(cè)試劑
產(chǎn)品描述
一系列結(jié)構(gòu)多樣的配體,從光子到大肽,激l活GPCRs來(lái)激發(fā)它們的生理功能。配體結(jié)合的GPCRs,反過(guò)來(lái),起到鳥呤核苷酸交換的作用Gβγ存在下Gα亞基上的GDP與GTP交換的催化因子,導(dǎo)致Gα亞單位與Gβγ二聚體分離形成兩個(gè)功能單元(Gα和Gβγ)。Gα和Gβγ亞單位都向各種細(xì)胞信號(hào)通路發(fā)出信號(hào)。根據(jù)順序與功能同源,G蛋白分為四個(gè)家族:Gs,Gi、Gq和G12。增加這些G蛋白的效應(yīng)器和相互作用蛋白的數(shù)量已經(jīng)被鑒定,生理上G蛋白參與的過(guò)程正在增殖。
在G蛋白的四個(gè)亞家族中,G12/13亞家族的功能尚不清楚。在這個(gè)家族,有兩個(gè)成員,G12和G13,它們普遍表達(dá)。Gα12基因敲除小鼠看上去很正常。Gα13基因敲除小鼠表現(xiàn)出胚胎致死性(~E9.5)。Gα13-/-老鼠胚胎的血管系統(tǒng)有缺陷。G13對(duì)受體酪氨酸激酶的誘導(dǎo)也是必不可少的成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的遷移。