全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提

菌株的鑒定：對(duì)篩選得到的乳酸菌進(jìn)行16S rDNA序列分析，確定其種屬。將活化好的菌液，進(jìn)行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16]，然后對(duì)基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，擴(kuò)增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL：10×buffer 5 μL；脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL；上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；解淀粉芽孢桿菌是一種廣泛分布于大自然中的革蘭氏陽(yáng)性菌，具有很強(qiáng)應(yīng)用潛力。模板DNA 1.5 μL ；ddH2O 37 μL。PCR擴(kuò)增條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反應(yīng)步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其純度及濃度，將達(dá)到測(cè)序要求的擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海華大基因進(jìn)行測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果在美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進(jìn)行比對(duì)，并確定其種屬。

Gonzalezortiz等用各5×108CFU/g的解淀粉

在寵物飼養(yǎng)中的應(yīng)用

在寵物飼養(yǎng)中Ba應(yīng)用雖然很少，但仍可見(jiàn)其飼喂后的抑菌效果。Gonz a lezortiz等用各5×108 CFU/g的解淀粉芽孢桿菌(CECT 5940株)和屎腸球菌(Enterococcus faecium，CECT 4515株)給成年健康比格犬飼喂39 d，飼喂前、后及停止飼喂6 d后，檢測(cè)試驗(yàn)犬糞便的細(xì)菌數(shù)量、pH、營(yíng)養(yǎng)消化率，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)犬和對(duì)照犬之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但糞便中病原性梭狀芽孢桿菌的數(shù)量極顯著降低(對(duì)照組為5.64 CFU/g，試驗(yàn)組為2.94±0.5 CFU/g)。0077g/mL，無(wú)可燃性、無(wú)腐蝕性、無(wú)性，閃點(diǎn)試樣加熱到99。

解淀粉芽孢桿菌作用機(jī)理

由上述各試驗(yàn)可知，在生產(chǎn)中，解淀粉芽孢桿菌可以提高動(dòng)物的飼料利用率，同時(shí)增強(qiáng)動(dòng)物的抗病能力，其中前者與其產(chǎn)生的多種酶有關(guān)，后者與其消耗腸道內(nèi)氧氣從而抑制需氧致病菌的生長(zhǎng)、產(chǎn)生多種物質(zhì)及調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)能關(guān)系密切。

解淀粉芽孢桿菌產(chǎn)生的酶

解淀粉芽孢桿菌可以產(chǎn)生α-淀粉酶、α-乙酰乳酸、脫羧酶、β-內(nèi)切葡聚糖酶、半纖維素酶、植酸酶、麥芽糖淀粉酶以及木聚糖酶等，這些酶可以轉(zhuǎn)化復(fù)雜的分子，尤其是木質(zhì)纖維素，使動(dòng)物飼料中的限制因子轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)單組分，利于動(dòng)物消化吸收，從而提高飼料轉(zhuǎn)化率。Supriyati的試驗(yàn)也證實(shí)，用Ba發(fā)酵的米糠粗纖維含量降低(10.62％～7.79％)，而粗蛋白含量增加(12.10％~13.40％)。Mallo等[33]研究發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌CECT5940孢子制劑添加到肉雞飼糧中可以降低產(chǎn)氣莢膜梭菌、大腸桿菌、鼠桿菌等致病菌的數(shù)量，增加飼糧中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及淀粉的消化率。

復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥內(nèi)含的多種功能性

復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥內(nèi)含的多種功能性微生物進(jìn)入土壤后，在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中產(chǎn)生大量的次生代謝產(chǎn)物，這些產(chǎn)物能夠促進(jìn)土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的形成。團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的形成使土壤變得疏松、綿軟，保水保肥性能增強(qiáng)，水、氣、熱更加協(xié)調(diào)，減少土壤板結(jié)，有利于保水、保肥、通氣和促進(jìn)根系發(fā)展，為農(nóng)作物提供舒適的生長(zhǎng)環(huán)境。土壤理化性狀的改善，加強(qiáng)了土壤有益微生物的活動(dòng)，從而較大限度促使有機(jī)物分解轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和刺激性物質(zhì)，反過(guò)來(lái)又刺激微生物的生長(zhǎng)發(fā)育，促進(jìn)作物生長(zhǎng)，而達(dá)到增產(chǎn)增收的目的。其原因主要有：1)部分解淀粉芽孢桿菌防效不穩(wěn)定，容易受到環(huán)境影響。另外，功能性微生物在作物根系周?chē)纬蓛?yōu)勢(shì)種群，抑制或拮抗有害病原菌的生長(zhǎng)繁殖，減輕了作物發(fā)生病害的程度，進(jìn)而起到增加產(chǎn)量的目的。