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液相色譜柱檢測器的功能
檢測器的功能是對柱后已被分離的組分的信息轉(zhuǎn)變?yōu)楸阌谟涗浀碾娦盘?,然后對各組分的組成和含量進(jìn)行鑒定和測量,是色譜儀的眼睛。原則上,被測組分和載氣在性質(zhì)上的任何差異都可以作為設(shè)計(jì)檢測器的依據(jù),但在實(shí)際中常用的檢測器只有幾種,它們結(jié)構(gòu)簡單,使用方便,具有通用性或選擇性。檢測器的選擇要依據(jù)分析對象和目的來確定。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)目前多采用配備操作軟件包的工作站,用計(jì)算機(jī)控制,既可以對色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行自動(dòng)處理,又可對色譜系統(tǒng)的參數(shù)進(jìn)行自動(dòng)控制。
液相色譜儀在生物制藥中的應(yīng)用
液相色譜儀是近幾十年發(fā)展起來的一種、快速的分離分析技術(shù),是現(xiàn)代分離檢測的重要工具。液相色譜儀是以經(jīng)典液相色譜儀為基礎(chǔ),引入氣相色譜儀的理論和實(shí)驗(yàn)方法,將流動(dòng)相改為高壓輸送,采用固定相和在線檢測等手段,發(fā)展而成的分離分析技術(shù),具有高壓、高速、、高靈敏度、高選擇性和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn),成為生物制藥領(lǐng)域發(fā)展快、應(yīng)用的現(xiàn)代分析技術(shù)之一。
固相萃取柱和液相色譜柱的比較
兩者本質(zhì)上是不同的東西,固相萃取柱是用來做固相萃取用的,主要作用是過濾和富集樣品,而液相色譜柱是液相色譜上使用的,用來分析樣品的。
固相萃取柱是樣品處理的時(shí)候用的,液相色譜柱是儀器上的一個(gè)配件相當(dāng)于,機(jī)子不可或缺的一部分,使組分分開才進(jìn)檢測器檢測的。
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液相色譜柱注意事項(xiàng)
色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱。
① 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
② 應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?
③ 一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
④ 選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
⑤ 避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
⑥ 經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。