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制備柱跑干了影響柱效嗎?
如果時間不長的話,可以用流動相多沖幾個小時,柱效不一定變化很大。如果時間太久,柱效一定變低,具體造成影響有多大,要靠柱效測定來確定,而不是干柱時間的長短。如果跑干了,對于PUMP的影響可能還大些,所以盡量先把管路中的空氣抽走再說。
一般說來,制備柱子跑干,屬于操作失當(dāng)。柱子閑置不用時,盡量沖入甲醇或其他有機(jī)的溶劑,一定要把兩頭堵住密封,這樣保留的時間會較長。
同一種填料的分析柱、制備柱按線形放大公式套,分離度會不會變化?
一般會有一定的變化,原因有以下幾點(diǎn):
(1)制備柱的裝填是否均勻,如不均勻則可能產(chǎn)生渦流擴(kuò)散使各個組分的經(jīng)過通道的直徑不同、阻力不一樣,停留時間不同,色譜峰可能變寬。
(2)如果樣品在流動相中溶解度小,在制備色譜上會有不同的峰展寬。
(3)如果樣品在分析柱上有展寬或拖尾的現(xiàn)象,放大到制備柱上后峰的展寬和拖尾經(jīng)常會非常嚴(yán)重,導(dǎo)致分離失敗。
制備色譜
制備色譜是以分離出純物質(zhì)為目的的色譜系統(tǒng),分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng),基于他們目的的不同,制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征,不能簡單等同。
當(dāng)我們在實(shí)驗室中想得到納克乃至毫克級的純物質(zhì)時,稍微改裝下分析型色譜系統(tǒng)就能簡單輕松的完成,不過,若所需制備的純品量很大,此時,再用分析型色譜系統(tǒng)分離純化,可以預(yù)見這將是一場“災(zāi)難”。
制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應(yīng)對不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時盡可能減少成本。