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固相萃取柱的填料和容量
固相萃取填料通常是色譜吸附劑,可分為三大類:一類是以硅膠為基質(zhì)(例如C18、C8等);第二類是以高聚物為基質(zhì),例如聚乙烯-二乙烯苯等;第三類是以無機(jī)材料為主的,例如弗羅里硅藻土、氧化鋁、石墨化碳等。
在選擇固相萃取柱時,必須考慮柱容量。由于我們面對的樣品基質(zhì)通常都較為復(fù)雜,例如食品、生物樣品等等。在固相萃取中,固相萃取吸附劑對目標(biāo)化合物吸附的同時,也會吸附同類性質(zhì)的雜質(zhì)。因此,在考慮柱容量是應(yīng)該是目標(biāo)化合物加上可被吸附的雜質(zhì)總量不能超過柱容量。否則在載樣的過程中就可能有部分目標(biāo)化合物不能被吸附,造成回收率偏低。
固相萃取柱的選擇及常見問題
根據(jù)基質(zhì)性質(zhì)選擇:
吸附劑主要可根據(jù)目標(biāo)化合物性質(zhì)和基質(zhì)性質(zhì)進(jìn)行選擇。
吸附劑的選擇則大致可由以上兩種方式進(jìn)行選擇,對于具體實例,可依據(jù)“區(qū)分目標(biāo)化合物和主要干擾物”的原則進(jìn)行選擇。
選擇出適宜的吸附劑后,還需要根據(jù)檢定所需的樣品量選擇合適的柱規(guī)格。由于萃取柱的吸附劑能吸附的化合物質(zhì)量是有限的,一旦超過了這個數(shù)值,目標(biāo)物就不能被有效保留,使得洗脫效果大打折扣。因此,根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格,是很有必要的。
固相萃取柱規(guī)格填料的選擇
固相萃取柱填料可以保證持續(xù)一致的填料粒徑和比表面積,確保小柱高的回收率,每支、每批之間高的穩(wěn)定性與重現(xiàn)性。
對于反相、正相和吸附型固相萃取柱來說,被萃取樣品的質(zhì)量不要超SPE 柱填料的5 %(同一種吸附劑對不同目標(biāo)物的選擇性不同。此數(shù)值僅供參考!);離子交換型的固相萃取柱,須考慮離子交換的容量。
在實驗中固相萃取柱的選擇與分類
柱壓力方式選擇
柱壓力可分為:減壓、加壓、常壓。減壓柱能夠減少固定相硅膠的使用量。
固相萃取柱加壓是一種較好的使用方式,特別適用于易分解樣品的分離。加壓可以增加淋洗劑的流動速度,減少產(chǎn)品收集時間;其他條件相同時,常壓柱效率較高,但耗時,比如天然化合物的分離。
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