固相萃取柱規(guī)格介紹

常見(jiàn)的固相萃取柱大都以PP為材料的注射針筒型裝置，該裝置內(nèi)裝有兩片以聚乙烯（PE）或玻璃纖維為材料的塞片，兩個(gè)塞片中間裝填有一定量的色譜吸附劑（填料）。固相萃取柱上端敞開(kāi)，下端為出液口，液體經(jīng)過(guò)吸附劑后從出口排出。根據(jù)經(jīng)典固相萃取柱填料上方的空間體積，固相萃取柱的規(guī)格可分為1 mL、3 mL、6 mL、10 mL、15 mL、20 mL、30 mL、60 mL等等。也有根據(jù)具體應(yīng)用要求而生產(chǎn)的特殊規(guī)格的固相萃取柱。從固相萃取柱的外觀看，經(jīng)典的固相萃取柱與注射針筒相近，是直筒型的。另外一種固相萃取柱上端是漏斗形，便于在手動(dòng)操作時(shí)一次性載入較多的樣品。

固相萃取柱的正確使用步驟是什么呢？

一、參考固相萃取柱的類(lèi)型及應(yīng)用，選擇適當(dāng)?shù)奶盍项?lèi)型，然后選擇固相萃取柱的大小和填料量。

反相、正相和吸附類(lèi)型的過(guò)程：被萃取樣品的質(zhì)量不超過(guò)柱中填料量的5%，也就是說(shuō)，如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱，分析物質(zhì)不超過(guò)5毫克。

離子交換過(guò)程：您必須考慮離子交換的容量：SAX和SCX其吸附劑容量為0。2毫當(dāng)量/克。

第二、選擇好萃取柱后，按步驟進(jìn)行萃取過(guò)程：正相類(lèi)型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的溶劑來(lái)預(yù)處理。離子交換填料將用于非極性溶劑中的樣品，其用3-5ml的去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來(lái)預(yù)處理。為了使固相萃取填料從預(yù)處理到樣品加入時(shí)都保持濕潤(rùn)，允許大約1毫升的預(yù)處理溶劑在管過(guò)濾片（frit）或萃取片表面之上。如果樣品是從一個(gè)貯液管或過(guò)濾管引入固相萃取管，則多加入0。5毫升的預(yù)處理溶劑到1毫升的固相萃取管中，如果是2毫升到3毫升的萃取柱中，多加入4升到6毫升管中等等。這是為了保證在樣品加入之前萃取柱濕潤(rùn)。如果在樣品加入之前，萃取柱中的填料干了，重復(fù)預(yù)處理過(guò)程。在重新引入溶劑之前，用水沖洗柱中緩沖溶液的鹽。

固相萃取柱的工作原理

固相萃取裝置，完全遵循了固相萃取的工作原理，每次可同時(shí)處理多個(gè)樣品。在整個(gè)樣品處理過(guò)程中，裝置采用高功率，高精度步進(jìn)電機(jī)準(zhǔn)確控制小柱的流速，精度可達(dá)0.1ml/min。從而根本上克服了傳統(tǒng)手動(dòng)固相萃取裝置（負(fù)壓或正壓），因受不同小柱間阻力（壓力）差異影響，柱與柱之間的流速差異巨大，單個(gè)小柱流速無(wú)法準(zhǔn)確控制，導(dǎo)致浪費(fèi)了時(shí)間，人力，物力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻無(wú)法保證的尷尬結(jié)果。

使用固相萃取柱時(shí)應(yīng)注意的影響因素

溶劑的選擇

在固相萃取中，萃取固定相的活化、上樣富集、淋洗雜質(zhì)、分析物洗脫的過(guò)程中，都涉及溶劑的選擇問(wèn)題。溶劑選擇重要的是溶劑強(qiáng)度，這是保證固相萃取成功的關(guān)鍵表2給出了常見(jiàn)正相型和反相型固相萃取中溶劑的極性和強(qiáng)度大小關(guān)系。

對(duì)于固定相活化溶劑，一般先使用強(qiáng)的溶劑去除固定相上的雜質(zhì)，然后選擇與上樣溶劑強(qiáng)度一致的活化溶劑，以保證樣品能夠在固定相上充分保留。需注意的是，固定相在活化過(guò)程和活化結(jié)束后都要保持濕潤(rùn)，否則會(huì)使固定相干裂或者進(jìn)入氣泡，導(dǎo)致柱效降低、回收率降低以及重現(xiàn)性變差。

對(duì)于上樣溶劑的選擇，要盡可能選擇弱強(qiáng)度的溶劑，保證樣品能夠充分地保留在固相萃取柱上，還可以采用大量上樣方法，提高富集倍數(shù)。如果上樣溶劑強(qiáng)度過(guò)高，樣品不能保留或者弱保留，則回收率低。

對(duì)于洗脫溶劑，要選擇溶劑強(qiáng)度比較大的，保證保留在固定相上的樣品洗脫下來(lái)，對(duì)大多數(shù)化合物來(lái)說(shuō)，是一種比甲、乙醇更好的洗脫溶劑。另外，選擇的洗脫溶劑要與后續(xù)的分析條件相適應(yīng)。還有就是要選擇黏度小、純度高、毒性小并且不與樣品和固定相發(fā)生反應(yīng)以及不會(huì)干擾樣品后續(xù)檢測(cè)的溶劑。如果單一的洗脫溶劑效果不理想，也可考慮使用混合溶劑進(jìn)行洗脫。