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親和柱的概念
親和柱/親和膜,都是醫(yī)類分離器.如除內(nèi)毒素親和柱,以Sepharose4B為基質(zhì),配基為組氨酸,殼聚糖,季銨鹽等
實驗采用親和柱-熒光光度法快速測定了鮮牛乳及乳粉中黃曲霉毒素M1.試樣經(jīng)過離心、脫脂、過濾后,濾液經(jīng)過鍵合有黃曲霉毒素M1特殊抗體的親和柱凈化,此抗體對黃曲霉毒素M1具有專一的識別能力,黃曲霉毒素M1鍵合在氯霉素、等親和柱分離柱中的抗體上.將親和柱上雜質(zhì)除去,通過分離柱洗脫,加入溶液衍生,以提高測定靈敏度.衍生化后的洗脫液于熒光光度計中測定黃曲霉毒素M1,檢測低限為0.01μg/kg,在0.1-1.0μg/kg范圍內(nèi),回收率為89.6%-96.1%,變異系數(shù)為0.52%-5.8%,分析一個樣品的時間小于30min.,分析過程中不使用黃曲霉毒素M1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì).用FAPAS的參考標(biāo)樣證實了檢測方法、分析儀器和操作人員得到的結(jié)果是準(zhǔn)確可靠的。
親和柱介紹
生物分子之間的親和識別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用,這些親和作用屬于生物專一性識別;此外,某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用,如染料和某些酶(特別是脫氫酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用,都可以應(yīng)用于親和分離過程。
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你對親和柱了解多少?
親和柱可以應(yīng)對不同復(fù)雜的樣品基質(zhì),實現(xiàn)樣品中目標(biāo)毒素的有效回收,回收率總體保持理想。
親和柱中含有特異性抗體緊密附著在載體上,這些抗體可以與樣品中的毒素特異性結(jié)合,保存在親和柱中,進(jìn)一步洗脫可以得到待檢測的毒素。適用于濃縮和純化糧食、堅果或者牛奶等復(fù)雜基質(zhì)中的毒素樣品的提純。
主要應(yīng)用于赭曲霉素,嘔吐毒素和玉米赤霉素等毒素的提取和凈化。