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發(fā)布時(shí)間:2021-08-16 02:42  






ELISA試劑盒的成分

1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

2 酶標(biāo)記: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2

4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biāo)記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記和顯色劑)



ELISA試劑盒的發(fā)展前景

臨床測(cè)定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展,而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。分子生物學(xué)正在并肯定會(huì)讓對(duì)整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)徹底的認(rèn)識(shí),其對(duì)測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的,對(duì)以些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定,并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。

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ELISA試劑盒——ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

1、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。

2、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
3、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
4、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
5、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo),使之穩(wěn)定10分鐘以上。
6、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
7、待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果。
8、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
9、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
10、對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。



Elisa試劑盒操作步驟

1、固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。

2、包被或抗原的挑選:將或抗原吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。

3、 酶標(biāo)記作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法',在正式試驗(yàn)體系里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度。

4、酶的底物及供氫體的挑選:對(duì)供氫體的挑選要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。



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