水中糞大腸菌群的常見檢測方法

1、聚合酶鏈?zhǔn)郊夹g(shù)

提取糞大腸菌群混懸液和待測水樣的DNA，利用PCR技術(shù)擴增編碼約260bp的LacZ基因（β-半乳糖苷酶基因）和約150BP的UdiA基因（β-D-半乳糖苷酶基因）的DNA，分別檢測大腸菌群數(shù)和大腸桿菌。

2、熒光原位雜交技術(shù)

由于糞大腸菌群特異的DNA序列，借助熒光標(biāo)記的特異寡聚核苷酸片段作為的探針與待測水樣中的DNA分子雜交，將雜交細胞經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量分析，確定菌群數(shù)。

酶底物在細胞生物學(xué)領(lǐng)域指參與生物化學(xué)反應(yīng)的化學(xué)物質(zhì)，能為化學(xué)元素成分、分子結(jié)構(gòu)或化合物，經(jīng)酶作用可形成產(chǎn)物。一個生物化學(xué)反應(yīng)的底物通常同時也是另外一個化學(xué)反應(yīng)的產(chǎn)物，酶底物法現(xiàn)階段簡易，準(zhǔn)確、省時省力、高xiao率的分析法，接下來我們詳細介紹下酶底物法的方法優(yōu)點和產(chǎn)品特性。

方法優(yōu)點：

1.不需要在無菌車間內(nèi)操作

2.手動操作時間低于1分鐘。

3.不需要培養(yǎng)液制備和大量玻璃容器殺菌。

4.24小時就可以完成定性定性分析，不需要檢驗試驗。

酶底物法定量封口機是現(xiàn)在很多實驗室在對水中微生物檢測的實驗儀器，那使用起來可能很多人都知道操作步驟是什么，但是在實驗檢測完成后應(yīng)該怎么對儀器進行保養(yǎng)呢？

酶底物法定量封口機保養(yǎng)程序：

1、確保電源關(guān)閉，并從機器上拔掉。等待機器冷卻90分鐘后，再拿下進口托板。擰下四個前擋蓋螺絲，拿掉前擋蓋。

2、松開機器內(nèi)下端固定下磙的鎖絲。

3、首先提起下磙，再將它拿出，要避開封口機底版上的定位針。

4、使用弱清潔劑、稀釋漂bai粉或異丙chun清洗封口機內(nèi)可以接觸到的部分以及下磙。（不要用砂紙等材料擦洗；不要用腐蝕性物質(zhì)清洗；冷卻后才可以用酒精；對于陳舊污垢，需要給清潔劑一些時間；不要隨意拆卸下磙部件，要用紙巾或軟布擦干內(nèi)部，）

5、重新裝好下磙，注意對準(zhǔn)定位針，擰緊鎖絲。

6、裝上前擋蓋，擰緊螺絲，裝回進口托板。此時封口機進入使用狀態(tài)

什么是總大腸菌群?

總大腸菌群是指一群在37℃培養(yǎng)24小時和48小時后，能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。它不是某一種或某一屬細菌，而是具有共同特性的一組細菌。

為什么要檢測飲用水中總大腸菌群?

天然水體中含有多種微生物，要判斷水質(zhì)中是否含有病原微生物、需檢測每一種病原微生物，由于種類多和檢測困難的原因，實際工作中很難做到。人和其它溫血動物，如牛、羊、狗等的腸道存在大量的總大腸菌群，如果飲用水受到糞便污染時，容易在水體中檢測到，總大腸菌群的檢測方法也簡單易行;并且總大腸菌群對消毒劑的抵抗力與其他腸道致病菌相似，消滅了總大腸菌群，可以認為致病腸道細菌也已消滅。針對病原微生物的一些共同特征，就選取總大腸菌群為病原微生物的指示菌之一，水中總大腸菌群含量的多寡，可在一定程度上反映水質(zhì)受病原微生物污染的狀況，在水質(zhì)衛(wèi)生學(xué)評價時具有重要意義。