分光光度計的工作原理

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分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I0為入射的單色光強度；

I 為透射的單色光強度；

T 為物質的透射率；

k 為摩爾吸收系數(shù)；

L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長；

c 為物質的濃度；

分光光度計的日程維護方法

分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術指標的簡易測試方法，自己經(jīng)常對儀器進行維護和測試，以保證儀器工作在較好的狀態(tài)。

一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。

二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。

三、儀器使用一定周期后，內(nèi)部會積累一定量的塵埃，盡量由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，然后，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄。

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1)儀器不能調零?？赡茉颍?

a)光門不能完全關閉。解決方法：修復光門部件，使其完全關閉。

b)透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調整“100%”旋鈕。

c)儀器嚴重受潮。解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。

d)電路故障。解決方法：送修理部門，檢修電路。

2)儀器不能調“100%”。可能原因：

a)光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈(盡管燈還亮)。

b)比色皿架未落位。解決方法：調整比色皿架使其落位。

c)光電轉換部分老化。解決方法：更換部件。

d)電路故障。解決方法：調修電路。

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分光光度計的應用范圍

超微量紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器，無論在物理學、化學、生物學、醫(yī)學、材料學、環(huán)境科學等科學研究領域，還是在化工、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門，超微量紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應用。超微量紫外可見分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析，常用于核酸，蛋白定量及細胞培養(yǎng)檢測；超微量紫外可見分光光度計已經(jīng)是現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。