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life 水凝膠中細(xì)胞的固定與標(biāo)記
使用小分子物質(zhì),例如熒光標(biāo)記 phalloidin,核酸染料,活性和毒性檢測(cè)試劑,增值檢測(cè)試劑等小分子物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記方法,除了在孵育時(shí)間上適度延長(zhǎng)以便能在水凝膠中充分?jǐn)U散外,與傳統(tǒng)的 2D 細(xì)胞培養(yǎng)方式相同。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白,則可直接用于觀測(cè),因凝膠完全透明不影響觀測(cè)結(jié)果。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白,則可直接用于觀測(cè),因凝膠完全透明不影響觀測(cè)結(jié)果。如果使用抗l體等大分子對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記則不能直接在水凝膠中開(kāi)展,因水凝膠的孔徑原因,不適合直接抗l體標(biāo)記,需要使用 dextranase 將細(xì)胞從水凝膠中釋放出來(lái),如果擔(dān)心細(xì)胞在操作過(guò)程中細(xì)胞生理活動(dòng)波動(dòng),則可經(jīng)在凝膠中將細(xì)胞固定后在進(jìn)行操作。
如果按支持材料形成的方式分,基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為如下兩類(lèi),一種是將細(xì)胞分散在液體水凝膠中,然后通過(guò)交聯(lián)實(shí)現(xiàn) 3D 培養(yǎng),這類(lèi)產(chǎn)品代表生產(chǎn)商包括 Cellendes, Matrigel, Glycosan Biosystems 和 QGel 等;另外一種是將細(xì)胞「播種“在 3D 基質(zhì)上,這類(lèi)方法的代表廠商包括 3D Biotek, Alvetex 和 AlgiMatrix 等。而3DInsert-PCL支架是有彈性的,可以切割,可做切片。第l一種方式中的 Cellendes 產(chǎn)品上面已經(jīng)做了簡(jiǎn)要介紹
3D Insert-PCL/PS三維支架成功培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型;
3.都包含3D Insert 6孔培養(yǎng)板,12孔培養(yǎng)板,24孔培養(yǎng)板,48孔培養(yǎng)板和96孔培養(yǎng)板,供您選擇。
3D Insert-PS支架培養(yǎng)板和3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板的不同之處,以及該如何選擇哪:
1. 3D Insert-PS支架是透明的,因?yàn)榭捎玫怪蔑@微鏡實(shí)時(shí)觀測(cè)細(xì)胞的狀態(tài);而3D Insert-PCL支架是不透明的,因此如果要觀測(cè)細(xì)胞的狀態(tài),需做切片后觀測(cè)。