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工業(yè)合成:三羥本身由于結(jié)構(gòu)簡單,以中心碳原子呈四面體結(jié)構(gòu),含三個羥和一個氨基,可以進行多種取代和氧化還原反應(yīng),是一種化工合成原料。緩沖劑TAPS的一種合成方法就是利用Tris和1,3-丙磺酸內(nèi)酯在醇中合成的。通常要采購用于工業(yè)合成的Tris原料對試劑純度要求不高,重點是量大,找產(chǎn)能較大的原料生產(chǎn)廠家是比較劃算的。
研發(fā):氨基為不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3起反應(yīng),使 H2CO3減少,同時又生成HCO32-,能攝取氫離子而糾正酸血癥,其作用較強,且能透過細胞膜,常用于急性代謝性及呼吸性酸血癥;作為堿性,用于酸的糾正,且不會引起二氧化碳滯留增加。由于是用于制藥,對Tris的整個生產(chǎn)原料來源、生產(chǎn)工藝路線、產(chǎn)品純度、雜質(zhì)離子含量都是嚴格要求的,采購這一類產(chǎn)品必須嚴格謹慎,一定要經(jīng)過嚴格檢測。
一旦確定了緩沖液的pH值,就需要選擇使用什么樣的緩沖體系。首先是在選擇緩沖體系時要確保選擇的緩沖體系在你設(shè)定的pH值上確實具有緩沖能力。選擇的緩沖體系,其解離常數(shù)pKa值應(yīng)該在設(shè)定的pH上下一個pH值單位內(nèi)。
再者是確保你使用的緩沖液濃度足夠高以達到實際緩沖溶液的作用,正常一般選擇的濃度是20~100mM。需要記住的是你所使用的緩沖體系不應(yīng)該影響蛋白活性!例如,磷酸鹽會抑制激酶的活性,所以反應(yīng)前應(yīng)徹底地透析掉。