Tris理化性質(zhì)：

 英文名 Trometamol

中文名： 三羥

　　分子量： 121.135

分子式： (HOCH2)3CNH2　

外觀： 白色晶體粉末

溶解性：溶于水和乙醇，微溶于、苯，不溶于、。

pKa：室溫下為8.1，水溶液pH10.5

緩沖范圍：7.0-9.2

Tris緩沖液通常被用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑，由于生物緩沖劑Tris的2號位碳原子連有氨基，水溶液呈堿性，DNA溶解于此溶液時會被去質(zhì)子化，從而提高溶解性。作為緩沖劑時，Tris通常需要搭配弱酸使用，比如搭配鹽酸使用或者直接做成Tris-HCl鹽。除了搭配比較多的HCl外，還經(jīng)常與醋酸、硼酸搭配使用，以及電泳緩沖液中搭配甘氨酸使用。

Tris-HCl緩沖液的缺點：1、緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；2、溫度效應(yīng)大，溫度變化對緩沖液pH值的影響很大，即：△pKa／℃＝－0.031 ，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。3、易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封。

   蛋白制備及純化過程中緩沖液的選擇非常重要，合適緩沖液才能保證蛋白的活性和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。

      當我們純化蛋白時，的就是要保持蛋白在純化過程中不能失活，或者是盡量降低純化過程對蛋白活性帶來的損失。這就意味著蛋白在整個純化過程中要始終保持可溶性和活性。

       因此設(shè)計一個防止蛋解和聚合的蛋白純化緩沖體系就非常重要了，尤其會凸顯在實驗結(jié)果上。在設(shè)計緩沖buffer時應(yīng)考慮以下幾個因素：pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩(wěn)定劑。其中每一個因素都要根據(jù)你的目的蛋白進行優(yōu)化，并以目的蛋白的活性作為優(yōu)化的評估標準。

 此外，一些緩沖體系對溫度非常敏感，例如Tris-HCl緩沖液，如果你在25℃時將緩沖體系調(diào)至pH值8，pH值將在5℃時增加到8.58而在37℃時降到7.71。所以，如果打算在4℃條件下保存蛋白或在37℃進行實驗，就應(yīng)該考慮到室溫下調(diào)的pH值可能在實驗條件中就不適用了。  其他類型的色譜分離柱，如凝膠過濾柱和Ni2 親和層析柱，可能需要更高的鹽濃度。我一般用高達500 mM NaCl進行高鹽淋洗，以防止蛋白和柱之間的非特異性結(jié)合。