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微量吸管使用:1、目的:掌握微量吸管的實(shí)驗(yàn)方法。2、原理:擠壓乳膠頭使微量吸管產(chǎn)生負(fù)壓而吸取液體。3、實(shí)驗(yàn)用品:次性微量吸管、 帶孔乳膠吸頭、試管、2ml吸管、NS等。4、標(biāo)本:新鮮抗凝l血。5、操作方法:(1)準(zhǔn)備吸管將帶孔的乳膠吸頭套在微量吸管上,連接處應(yīng)嚴(yán)密不漏氣。(2)加稀釋液取試管1支,加生理鹽水2ml。(3)持管吸血右手拇指和中指夾住吸管及吸頭交接處,示指蓋住吸頭小孔,三個(gè)指頭輕微用力,排出適量的氣體使管內(nèi)形成較小的負(fù)壓,將管尖插入抗凝l血(或末梢血),三個(gè)指頭慢慢松勁,吸取抗凝l血到所需刻度后,抬起示指,注意管尖始終不要離開液面,以免吸入氣泡,也不要過度用力將血液吸入乳膠吸頭。
(五)操作:1、稀釋血液:取試管1支,加紅細(xì)胞稀釋液2ml,加抗凝l血10微升,立即混勻,制成紅細(xì)胞懸液。2、準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板:用綢布拭凈改良牛鮑計(jì)數(shù)板和專業(yè)蓋玻片,采用推式法從計(jì)數(shù)板下緣向前平推蓋玻片,將其蓋在計(jì)數(shù)池上。3、沖池:用完了吸管吸取制備好的再次混勻的紅細(xì)胞懸液,沿蓋玻片與計(jì)數(shù)板之間的縫隙沖入計(jì)數(shù)池。充液量以恰好充滿一側(cè)計(jì)數(shù)池為宜, 不可過多、過少或有氣泡,否則需重新操作。
顯微鏡法紅細(xì)胞計(jì)數(shù):原理:用等滲稀釋液將血液稀釋一定的倍數(shù)后,滴入計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)紅細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算可求得每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。紅細(xì)胞稀釋液:●Hayem液(赫姆氏紅細(xì)胞稀釋液);●枸櫞酸鈉稀釋液;●普通生理鹽水或加1%甲醛的生理鹽水。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的區(qū)域:中心大方格中的5個(gè)中方格(正中一個(gè)和四角各一個(gè))。