低溫生物菌種通用工藝包

生物的菌種產(chǎn)品在不同規(guī)模的小試和中試系統(tǒng)上進行過工藝開發(fā)與連續(xù)生產(chǎn)，已開發(fā)出在多種應用場景下利用吉態(tài)來生物微生物菌種進行生產(chǎn)的通用工藝包。使用過的原料包括：合成氨弛放氣、焦爐煤氣、生物質(zhì)氣化氣、鋼瓶氣和工業(yè)等。產(chǎn)出的產(chǎn)物包括：飼料蛋白原料（魚粉替代物）、生物油脂（脂肪酸）、生物柴油（脂肪酸甲酯）等大宗原料或產(chǎn)物，以及蛋白酶、DHA等高附加值產(chǎn)物。中試實現(xiàn)連續(xù)運行、穩(wěn)定生產(chǎn)。該通用工藝包采用模塊化設計，其中模塊A為吉態(tài)來生物的菌種產(chǎn)品，B/C/D為對應的發(fā)酵模塊、原料預處理模塊以及產(chǎn)物后處理模塊。工程企業(yè)可直接使用該工藝包進一步優(yōu)化，或在此基礎上為業(yè)主提供工程項目的定制解決方案

低溫生物菌種的使用溫度

普通硝化細菌在溫度低于15°C時，活性大幅度降低，硝化速度也明顯下降，溫度低于5°C時，普通硝化細菌的生命活動幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，普通中溫微生物適合生長溫度為25~37℃，目前污水處理廠的處理工藝大都可實現(xiàn)15°C左右氨氮達標排放，當溫度低于12°C時，中溫菌的活性大大降低，甚至沒有繁殖功能，使得污水廠COD、氨氮和磷處理效果變差，出水無法達標排放，投加COD去除劑，氨氮去除劑，除磷劑等化學絮凝劑或氧化劑，在增加污水廠運營成本的同時，又形成了二次污染。

低溫生物菌種的作用

從18年開始，就對北京順義馬坡工業(yè)區(qū)污水廠（日處理2000噸））進行微生物改良，經(jīng)菌種改良后，馬坡污水廠各項出水指標均低于北京排放標準，一直平穩(wěn)運行，被順義環(huán)保局評為污水站。18年又連續(xù)對河北承德日處理5萬噸的污水廠和遼寧長嶺縣日處理2萬噸的污水廠進行微生物改良，都取得了非常好的改良效果，冬季低溫氨氮指標一直持續(xù)穩(wěn)定達標，平穩(wěn)運行，沒有二次再補充過耐低溫生物菌種。

低溫生物菌種的液氮冷凍保藏法

(1)準備安瓿管用于液氮保藏的安瓿管，要求能耐受溫度突然變化而不致破碎，因此，需要采用硼硅酸鹽玻璃制造的安瓿管，安瓿管的大小通常使用75×10mm的，或能容1.2mm液體的。

(2)加保護劑與滅菌保存細菌、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的細胞時，則將空安瓿管塞上棉塞，1.05kg/cm2，121.3℃滅菌15分鐘:若作保存霉菌菌絲體用則需在安瓿管內(nèi)預先加入保護劑如10%的甘油蒸餾水溶液或10%二甲亞砜蒸餾水溶液，加入量以能浸沒以后加入的菌落圓塊為限，而后再用1.05kg/cm2>，121.3℃滅菌15分鐘。

(3)接入菌種將菌種用10%的甘油蒸餾水溶液制成菌懸液，裝入已滅菌的安瓿管;霉菌菌絲體則可用滅菌打孔器，從平板內(nèi)切取菌落圓塊，放入含有保護劑的安瓿管內(nèi)，然后用火焰熔封。浸入水中檢查有無漏洞。

(4)凍結再將已封口的安瓿管以每分鐘下降1℃的慢速凍結至-30℃。若細胞急劇冷凍，則在細胞內(nèi)會形成冰的結晶，因而降低存活率。

(5)保藏經(jīng)凍結至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷凍保藏器(圖Ⅶ-14)的小圓筒內(nèi)，然后再將小圓筒放入液氮保藏器內(nèi)。液氮保藏器內(nèi)的氣相為-150℃，液態(tài)氮內(nèi)為-196℃。

(6)恢復培養(yǎng)保藏的菌種需要用時，將安瓿管取出，立即放入38-40℃的水浴中進行急劇解凍，直到全部融化為止。再打開安瓿管，將內(nèi)容物移入適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。

此法除適宜于一般微生物的保藏外，對一些用冷凍干燥法都難以保存的微生物如支原體、衣原體、氫細菌、難以形成孢子的霉菌、噬菌體及動物細胞均可長期保藏，而且性狀不變異。缺點是需要特殊設備。