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等溫核酸試劑盒
RPA不受場地的限制,不需要昂貴儀器,對溫度要求低,恒溫擴增,時間短,可以在資源匱乏地區(qū)實現(xiàn)快速檢測的目的,目前已廣泛用于食品安全及動物疫病檢測,但國內(nèi)就PRA技術(shù)在禽病病原檢測中的研究并不多。未來RPA技術(shù)可能在以下方面進一步突破:①研發(fā)專門引物設(shè)計軟件,降低引物設(shè)計難度。②反應(yīng)溫度范圍拓寬,不局限于某一溫度,可在某溫度范圍內(nèi)完成擴增反應(yīng)。③實現(xiàn)多重檢測,結(jié)果判定更簡便直觀。④可擴增長片段核酸。⑤研發(fā)出低廉的酶制劑,降低成本。相信隨著技術(shù)不斷進步,勢會引起一場核酸檢測的革命,取代PCR技術(shù)在分子檢測中的霸主地位,在禽病病原的現(xiàn)場檢測中發(fā)揮更大的作用。
FAQ
能否進行熒光終點分析?
可以。這樣比較的是反應(yīng)開始時的熒光和反應(yīng)結(jié)束時的熒光,熒光增強意味著發(fā)生了擴增。
4能否支持生物素或熒光標記的寡核苷酸?
支持。在RPA反應(yīng)中,連有生物素或熒光團的引物與未修飾的引物表現(xiàn)差不多。據(jù)悉還沒有發(fā)現(xiàn)任何差異。
5跑膠前需要回收RPA產(chǎn)物嗎?
需要。RPA反應(yīng)中的物質(zhì)會干擾瓊脂糖電泳,如果不進行產(chǎn)物回收,跑出來的帶會出現(xiàn)拖尾。
核酸試劑盒
怎樣檢測樣本中的病毒?
在檢測血液樣本時,運用人工合成的抗原,通過與樣本中的特異性進行抗原結(jié)合反應(yīng)并轉(zhuǎn)化成可視信號來進行測定。目前,已批準的病毒檢測試劑盒有膠體金法和磁微?;瘜W發(fā)光法,膠體金法將反應(yīng)結(jié)果形成肉眼可見的條帶,檢測時間較短,一般15分鐘左右可以出結(jié)果,磁微?;瘜W發(fā)光法通過反應(yīng)過程中的光信號進行檢測,靈敏度高于膠體金法,檢測過程一般需要半小時。