三羥（Tris）作為一種常用的生物緩沖劑，因它的結(jié)構簡單，反而有活性，易于參與反應，所以我們可以通過它的分子結(jié)構制備出與它相關的產(chǎn)品。如Bis-Tris, Tricine，TES，TAPS等均為生物化學實驗和分子生物學實驗中經(jīng)常使用的緩沖劑，它們的分子結(jié)構中都含有Tris的分子結(jié)構。它也常被用作RNA雜交和DNA裂解的緩沖液。在Tris的使用中，需要注意：Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大，因此在配制過程中要考慮使用環(huán)境。且來看看它在Bis-Tris, Tricine，TES，TAPS中如何發(fā)揮它的潛能的。

Tris緩沖液是在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。

Tris-HCl緩沖液優(yōu)點

堿性較強，可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液；

對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。

Tris-HCl緩沖液缺點

pH受濃度影響較大，稀釋10倍，pH變化大于0.1

溫度效應大，如4℃時pH=8.4，37℃時pH=7.4

易吸收空氣中的二氧化碳

對某些pH電極有一定干擾作用，要使用與Tris溶液具有兼容性的電極

8mol/L乙酸鉀（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L（KCl）：溶解7.46g于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L乙酸鈉（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。

20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

10mg/mlRnase（無DNase）（DNase－free RNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中（pH 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl調(diào)pH至7.5，于-20℃貯存。（配制過程中要戴手套）