【廣告】
三(羥)Tris緩沖液為弱堿性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質(zhì)子化,從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。如果將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成,則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA),而換成硼酸則獲得“TBE緩沖液這兩種緩沖液通常用于核酸電泳實驗中。
Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的PH。Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些的中間物。Tris也被用作滴定標準物。 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。
三羥Tris是一種有機化合物,其CAS77-88-1,分子式為(HOCH2)3CNH2。作為一種常見的生物緩沖劑,三羥Tris不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,還可生產(chǎn)多種化工、、產(chǎn)品,是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些的重要中間物。此外還可以用于制備復(fù)合相變材料。相變材料是指隨溫度變化而改變物質(zhì)狀態(tài)并能提供潛熱的物質(zhì)。當物理狀態(tài)發(fā)生變化時,材料自身的溫度在相變完成前幾乎維持不變,形成一個寬的溫度平臺,但吸收或釋放的潛熱卻相當大。
Tris通常被用于核酸DNA或RNA的瓊脂糖凝膠電泳中的緩沖液,通常用的緩沖體系有TAE、TBE、TPE等,即生物緩沖劑Tris配合EDTA以及醋酸、硼酸、磷酸等配制成的緩沖溶液。不同公司使用的緩沖液有所差異,相對來說使用磷酸的TPE較少,主要是使用TAE和TBE緩沖液。在做核酸瓊脂糖凝膠電泳時,首先的準備工作就是制備凝膠,瓊脂糖凝膠做的好壞直接影響電泳效果和效率。這個制作過程耗時較長,節(jié)約時間考慮也可以直接購買制備好的預(yù)制凝膠。