表面活性劑是指加入少量能使其溶液體系的界面狀態(tài)發(fā)生明顯變化的物質(zhì)，具有固定的親水親油基團(tuán)，在溶液的表面能定向排列。表面活性劑的應(yīng)用可分為民用和工業(yè)應(yīng)用。民用表面活性劑中有2/3用于個(gè)人保護(hù)用品，工業(yè)用表面活性劑是民用表面活性劑以外用于各工業(yè)領(lǐng)域的表面活性劑總和。表面活性劑的分子結(jié)構(gòu)具有兩親性：一端為親水基團(tuán)，另一端為疏水基團(tuán)；親水基團(tuán)常為極性基團(tuán)，如羧酸、磺酸、硫酸、氨基或胺基及其鹽，羥基、酰胺基、醚鍵等也可作為極性親水基團(tuán)；而疏水基團(tuán)常為非極性烴鏈，如8個(gè)碳原子以上烴鏈。Tris含有三個(gè)羥基和一個(gè)氨基，均為良好的親水基團(tuán)，因此Tris也是合成表面活性劑的重要中間體。

三羥，英文名Tromethamine或Trometamol，簡(jiǎn)稱THAM，它是一種應(yīng)用非常廣泛的有機(jī)試劑，可用于制作、有機(jī)合成、生物緩沖劑等。其中在生化實(shí)驗(yàn)中，許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實(shí)驗(yàn)都需要用THAM作為生物緩沖劑。THAM可由與或在催化劑下高壓反應(yīng)，然后經(jīng)氮?dú)?、氫氣轉(zhuǎn)換制得。THAM極易溶于水，本身顯堿性，作為緩沖劑時(shí)通常需要配合酸一起使用，比如THAM-HCl緩沖液就是比較常用的，除此之外還有許多其他的緩沖液體系。

   蛋白制備及純化過(guò)程中緩沖液的選擇非常重要，合適緩沖液才能保證蛋白的活性和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。

      當(dāng)我們純化蛋白時(shí)，的就是要保持蛋白在純化過(guò)程中不能失活，或者是盡量降低純化過(guò)程對(duì)蛋白活性帶來(lái)的損失。這就意味著蛋白在整個(gè)純化過(guò)程中要始終保持可溶性和活性。

       因此設(shè)計(jì)一個(gè)防止蛋解和聚合的蛋白純化緩沖體系就非常重要了，尤其會(huì)凸顯在實(shí)驗(yàn)結(jié)果上。在設(shè)計(jì)緩沖buffer時(shí)應(yīng)考慮以下幾個(gè)因素：pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩(wěn)定劑。其中每一個(gè)因素都要根據(jù)你的目的蛋白進(jìn)行優(yōu)化，并以目的蛋白的活性作為優(yōu)化的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。

許多緩沖液中含有NaCl，以幫助保持蛋白的可溶性和模擬生理?xiàng)l件。一般常用150 mM的NaCl。

    在不同的蛋白純化步驟中，可能需要改變鹽離子的濃度。例如，如果是通過(guò)離子交換層析進(jìn)行蛋白純化，一開(kāi)始需要降低鹽離子的濃度（5~25mM）避免高離子強(qiáng)度和蛋白競(jìng)爭(zhēng)和填料結(jié)合，這樣可防止蛋白從離子交換柱中流穿，從而使柱子能夠結(jié)合目的蛋白，洗脫除去雜蛋白。