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低溫生物菌種報價常用指南【開碧源】

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發(fā)布時間:2020-12-25 15:55  







                                                      低溫生物菌種的技術規(guī)程

1、安瓿管或凍存管的準備

用圓底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料凍存管。注意玻璃管不能有裂紋。將凍存管或安瓿管清洗干凈,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。
2、 保護劑的準備
保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,應注意其濃度,一般采用10-20%甘油。
3、 微生物保藏物的準備
微生物不同的生理狀態(tài)對存活率有影響,一般使用靜止期或成熟期培養(yǎng)物。
分裝時注意應在無菌條件下操作。
菌種的準備可采用下列幾種方法:
刮取培養(yǎng)物斜面上的孢子或菌體,與保護劑混勻后加入凍存管內(nèi);
接種液體培養(yǎng)基,振蕩培養(yǎng)后取菌懸液與保護劑混合分裝于凍存管內(nèi);
將培養(yǎng)物在平皿培養(yǎng),形成菌落后,用無菌打孔器從平板上切取一些大小均勻的小塊(直徑約5-10毫米),真菌取菌落邊緣的菌塊,與保護劑混勻后加入凍存管內(nèi);
在小安瓿管中裝1.2-2毫升的瓊脂培養(yǎng)基,接種菌種,培養(yǎng)2-10天后,加入保護劑,待保藏。
4、 預凍

預凍時一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1℃為好、使樣品凍結到-35℃。





                                                         喚醒盛水的低溫生物菌種

目前,保藏中心保存有各類微生物資源5700種、50000余株,用于專利程序的生物材料有1萬余株。那么,數(shù)目龐大的微生物資源,從“清醒”到被“沉睡”經(jīng)歷了什么?

“首先進行存活度和純度檢測,然后用基因測定來核實菌種的正確性,繼而用真空冷凍干燥法或液氮超低溫凍結法保存菌種?!北2鼐N時一般兩種方法會互為備份,使用液氮法保存6份,真空法則要備份12個。

“通過冷凍技術處理后,細菌就會處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用,則需通過相應的培養(yǎng)液進行活化,才能恢復活性?!币愿袷鲜塞}堿為例說,復活菌種所需的營養(yǎng)為:20%的氯化鈉,酪蛋白、氨基酸、pH值為9等,在適宜的溫度和培養(yǎng)基中,這些沉睡的細菌便會被重新喚醒。




低溫生物菌種的復壯定義

菌種的復壯(rejuvenation):使衰的菌種恢復原來優(yōu)良性狀。

狹義的復壯是指在菌種已發(fā)生衰的情況下,通過純種分離和生產(chǎn)性能測定等方法,從衰的群體中找出未衰的個體,以達到恢復該菌原有典型性狀的措施;

廣義的復壯是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰前就有意識的經(jīng)常、進行純種的分離和生產(chǎn)性能測定工作,以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。實際上是利用自發(fā)突變(正變)不斷地從生產(chǎn)中選種。




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