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溫度傳感器
自PCR技術(shù)誕生以來已經(jīng)有三十年了。從經(jīng)典PCR、實(shí)時(shí)定量PCR再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR,這一技術(shù)在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。近年來,等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的興起無疑是對(duì)PCR的巨大挑戰(zhàn)。
等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的基因快速診斷方法,涉及生物檢測技術(shù)領(lǐng)域,具體是用體外生物檢測試劑快速檢測病原微生物的一種技術(shù)。
包括如下步驟:一、對(duì)被檢樣品進(jìn)行預(yù)處理;二、包括目標(biāo)靶基因數(shù)據(jù)庫的建立;生物信息學(xué)的分析比較;基因組多態(tài)性的分型處理和簡并堿基的運(yùn)用,獲得各種靶基因的特異性引物兩對(duì),分別與靶基因中的六個(gè)獨(dú)立區(qū)域序列特異性匹配;三、進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng);四、分析判斷結(jié)果。該方法的優(yōu)點(diǎn):不需特殊試劑與設(shè)備;高特異性;.靈敏度高;鑒定簡便;用途廣: 可用于食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域的質(zhì)量控制和環(huán)境、水質(zhì)等監(jiān)測;用于醫(yī)學(xué)臨床診斷,用于代謝性疾病和遺傳疾病的基因診斷。
溫度傳感器檢定裝置功能和特點(diǎn)
RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。
溫度傳感器的使用
RPA 便攜、等溫,可替代 PCR ,非常適合用于分子檢測試劑、動(dòng)物、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)中。
速度—— 檢測時(shí)間 15 分鐘以內(nèi);
敏感度—— 單分子檢測,不需要 thermocyler ;
簡單—— 穩(wěn)定的凍干試劑,幾乎沒有硬件要求的可靠等溫技術(shù)。
1.TwistAmp Basic 試劑盒( 96 次)
2.TwistAmp exo 試劑盒( 96 次)
3.TwistAmp nfo 試劑盒( 96 次)
4.Milenia Hybridtech 1 側(cè)向流試劑條
5.Milenia Hybridtech 2 側(cè)向流試劑條
溫度傳感器的發(fā)展?fàn)顩r
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過程進(jìn)行得非??欤话憧稍谑昼娭畠?nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。