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廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。丙磺酸SPE柱類型
在選擇固相萃取機(jī)理時(shí),應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機(jī)理,因?yàn)樵S多化合物同時(shí)具有多種功能基。例如:2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16),它在一定 pH條件下也可呈陽(yáng)離子態(tài),同時(shí)它又具有疏水性和親水性的非極性官能團(tuán)。此時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況,選擇有利于從干擾物中分離目標(biāo)化合物的萃取機(jī)理。當(dāng)樣品基質(zhì)中同時(shí)含有大量非極性干擾雜質(zhì)時(shí),應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機(jī)制,而應(yīng)采用以 pKa以下兩個(gè) pH單位或以 pH=2.16為限的陽(yáng)離子交換機(jī)制。相反,如果樣品中同時(shí)含有大量干擾雜質(zhì)陽(yáng)離子,則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高),采用非極性萃取機(jī)制更為有利。
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骨架形狀,粒徑,孔徑
硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無(wú)定型C18材料具有較高的性能價(jià)格比,是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性,但相對(duì)價(jià)格可能稍高,可作為精制的選擇。
現(xiàn)在市場(chǎng)上可供選擇的填料粒徑很多,中低壓備通常是為了增大上樣量,增加流速,減小壓力而選用大粒徑填料;由于可以達(dá)到較高的柱效,因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時(shí)還應(yīng)充分考慮孔徑,分子量小于5000 da時(shí)選擇孔徑(80~120 da),而對(duì)于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品,通常不采用C18分離模式,采用 SEC等模式進(jìn)行分離。
廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。丙磺酸SPE柱類型
SPE小柱相極固定比流動(dòng)相極性大的分離模式稱為正相模式。主要用途:
固相萃取材料極性表面與物極性官能團(tuán)極性相互作用;極性力比非極性力強(qiáng),但比離子力弱;常用的極性基團(tuán)有羥基,胺基,巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力,因?yàn)槿鯓O化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團(tuán)。結(jié)果表明: SPE正相萃取后,樣品基質(zhì)多為弱極性,如正己烷、二氯甲i烷、菜油等,而目標(biāo)物多含有極性官能團(tuán)。常用極性固定相包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。
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GP-C18通用反相色譜柱特點(diǎn):
利用高可控性的單分子層形成技術(shù)和封尾技術(shù)
*柱間重現(xiàn)率高
*選擇性和分離效i率高
適宜于分離酸性i、中性和堿性化合物,以及多種藥i物和多肽等
建議使用有i機(jī)溶劑或有i機(jī)溶劑/水系統(tǒng)的流動(dòng)相。
在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí),可利用極性相互作用,選擇正相萃取方式;而在極性樣品環(huán)境下,則可采用反相萃取方式。采用陽(yáng)離子交換機(jī)制,可將萃取過(guò)程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位,即 pH=2.16。研究發(fā)現(xiàn),保留機(jī)制的選擇主要受以下幾個(gè)因素的影響:保留機(jī)制一:目標(biāo)物官能團(tuán)的性質(zhì);保留機(jī)制二:樣品基質(zhì)的性質(zhì)。
SCX (強(qiáng)陽(yáng)離子交換)是一種以單分散型、無(wú)孔聚合物微球?yàn)檩d體的高i效離子交換色譜柱,用于快速、高i效地分離分析蛋白質(zhì)和多肽。
該 SPE色譜柱具有用于無(wú)極性和中度極性化合物的高保性烷i基合成相。
離子化固相萃取技術(shù)適合于分解為帶電離子的化合物,其作用機(jī)制是在帶電的目標(biāo)化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產(chǎn)生靜電吸引。試樣基質(zhì)可以是極性的,例如水溶液,也可以是非極性的有機(jī)溶液,但實(shí)際使用時(shí)用水溶液較多,如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。
所分析的目標(biāo)化合物必須具有下列任何一種或多種官能團(tuán),才能通過(guò)離子力從樣品溶液中分離出來(lái):(1)可產(chǎn)生陽(yáng)離子的官能團(tuán)(帶正電荷)(2)可產(chǎn)生陰離子的官能團(tuán)(帶負(fù)電荷),而待分析的目標(biāo)化合物必須在特定 pH環(huán)境下呈離子化或中性化。