廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。酸的存在可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類(lèi)的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。我們不斷追求，通過(guò)自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿(mǎn)足您的需要。

液相色譜柱的使用方法

關(guān)于色譜柱的安裝、維護(hù)、保存以及由色譜柱導(dǎo)致的這樣那樣的色譜故障也是一門(mén)學(xué)問(wèn)。gao效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過(guò)濾流動(dòng)相和樣品，凈化樣品，避免過(guò)高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時(shí)的沖洗等。

1.加裝保護(hù)柱

保護(hù)柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。50：50接近了這個(gè)極值，柱壓是比較高的，但影響柱壓z大的還是填料粒徑和色譜柱內(nèi)徑，你這個(gè)實(shí)例中不知用的什么規(guī)格的色譜柱。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、zhong成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護(hù)分析柱必不可少的措施。

保護(hù)柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線(xiàn)漂移時(shí),應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。

2.過(guò)濾流動(dòng)相和樣品

流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有ji溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過(guò)色譜柱的流動(dòng)相均應(yīng)過(guò)濾,但在實(shí)際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別:當(dāng)有ji溶劑用色譜純級(jí),水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有ji溶劑的質(zhì)量且沒(méi)有受到污染時(shí),過(guò)濾并無(wú)更多實(shí)際意義?？蛇x擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)，他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留4。

當(dāng)流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),則過(guò)濾是必要的,如前所述,當(dāng)緩沖溶液放置一段時(shí)間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過(guò)48 h,冬季一般不超過(guò)一周)后,在使用前還應(yīng)重新過(guò)濾。

所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0. 45μm ( 0. 22μm則更好)孔徑濾膜過(guò)濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。

裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線(xiàn)濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過(guò)載而起不到過(guò)濾作用。

3.凈化樣品

當(dāng)樣品中含有對(duì)色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生yong久性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機(jī)分子和強(qiáng)吸附性物質(zhì),以及可能對(duì)柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團(tuán)離子。在進(jìn)樣前應(yīng)盡可能對(duì)樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

4.避免過(guò)高柱壓

雖然gao效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000 p si (磅/平方英寸) ,但過(guò)高及過(guò)大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命,避免的方法是

(1)柱壓過(guò)高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過(guò)柱z大允許壓力的一半為宜。

( 2)當(dāng)流速較大時(shí),應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。

(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過(guò)20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。

5.注意溫度和酸堿度

一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱z高使用溫度不超過(guò)60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動(dòng)相pH接近使用限度時(shí),更應(yīng)降低使用溫度。

溫度過(guò)高會(huì)加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

正確及時(shí)的沖洗

開(kāi)始試驗(yàn)前,應(yīng)了解柱中當(dāng)前是何種溶劑。對(duì)于新色譜柱,如無(wú)特殊說(shuō)明均為評(píng)價(jià)報(bào)告中所用流動(dòng)相。柱中當(dāng)前溶劑一定要與分析樣品所用流動(dòng)相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過(guò)渡。

Kinetex液相色譜柱- HPLC 和 UHPLC 的核-殼優(yōu)勢(shì)

充分發(fā)揮 UHPLC 系統(tǒng)的性能

與市面上傳統(tǒng)的亞 2 μm 級(jí)色譜柱相比，Kinetex 1.3 和1.7 μm 核-殼色譜柱具有更高的柱效，可以實(shí)現(xiàn)出色的色譜分離度、更高的峰容量和更大的靈敏度，讓您可以從每

次 UHPLC 分析中獲得盡可能多的信息。

保護(hù)色譜柱而性能不下降

將污染物和微粒捕集在 SecurityGuard? ULTRA 保護(hù)柱系統(tǒng)中。

HPLC 和 UHPLC 的升級(jí)

在小流量 HPLC 或 UHPLC 系統(tǒng)上，Kinetex 2.6 μm 色譜柱的表現(xiàn)與全多孔亞 2 μm 級(jí)色譜柱相當(dāng)，柱效是 5 μm 填料的 3 倍、3 μm 全多孔填料的 2 倍。使用更短的 Kinetex色譜柱顯著提升現(xiàn)有方法的生產(chǎn)率和性能，同時(shí)減少溶劑消耗！

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷(xiāo)售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍：1、 亞速旺廣州代理。2、 美國(guó)精騏有限公司廣州一級(jí)代理。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國(guó)飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。同樣道理，色譜柱一段時(shí)間不用后，也應(yīng)該按照第4條，進(jìn)行小流速的沖洗色譜柱。6、 提供國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的玻璃、色譜耗材，3M、杜邦等防護(hù)產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計(jì)量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)玻璃裝置，定制各種實(shí)驗(yàn)異形裝置。

液相色譜柱使用問(wèn)題解析

氨基柱在進(jìn)酸性樣品時(shí)，很傷柱子，如使用一段時(shí)間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復(fù)？

答：氨基柱測(cè)酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類(lèi)的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的yi腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨)，之后再進(jìn)行分析這類(lèi)酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。多糖類(lèi)手性柱，涂覆型三(3,5-二甲ben基氨基甲酸酯）纖維素手性色譜柱(COD柱)，適用于sheng物堿、β-受體拮抗劑、胺等化合物的拆分。

色譜柱的技術(shù)都有哪些？比如封尾等，這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？

答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門(mén)藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。用純水沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗干凈使用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱對(duì)內(nèi)部填料的損傷是z大的，尤其是純水，除非你的色譜柱是耐水的——（如廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供的HP-C18色譜柱就比較耐水）。

國(guó)內(nèi)和國(guó)外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國(guó)內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開(kāi)發(fā)填料，一般買(mǎi)國(guó)外現(xiàn)成填料裝柱，買(mǎi)到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因?yàn)檠b柱歷史短，經(jīng)驗(yàn)積累少，裝柱工藝也沒(méi)有完全達(dá)到國(guó)外水平。另外，對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠，國(guó)產(chǎn)的還不過(guò)關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國(guó)外產(chǎn)品相比，差距很大。在這里推薦選擇廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供的色譜柱LuxAMP手性液相色譜柱色譜柱：Lux3μmAMP規(guī)格：150x3。

Kinetex液相色譜柱-HPLC 的核-殼優(yōu)勢(shì)

立即改善您的 3.5 μm 藥典方法

利用全新的 Kinetex 3.5 μm 核-殼技術(shù)，按照歐洲藥典或美國(guó)藥典的要求立即提升您當(dāng)前的 3.5 μm HPLC 方法的分離度、生產(chǎn)率和靈敏度。核-殼顆粒可以用于標(biāo)準(zhǔn) HPLC

系統(tǒng)或壓強(qiáng)限值更低的老式 HPLC 系統(tǒng)。

HPLC 的核-殼優(yōu)勢(shì)

立即改善 5 μm 和 3 μm 方法利用 Kinetex 5 μm 核-殼技術(shù)，立即提升您當(dāng)前的 3 μm和 5 μm HPLC 方法的分離度、生產(chǎn)率和靈敏度。核-殼顆粒可以用于標(biāo)準(zhǔn) HPLC 系統(tǒng)或壓強(qiáng)限值更低的老式 HPLC系統(tǒng)。

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷(xiāo)售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍：1、 亞速旺廣州代理。2、 美國(guó)精騏有限公司廣州一級(jí)代理。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國(guó)飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。6、 提供國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的玻璃、色譜耗材，3M、杜邦等防護(hù)產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計(jì)量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)玻璃裝置，定制各種實(shí)驗(yàn)異形裝置。

Gemini NX C18 在不斷變化 pH 值的流動(dòng)相下測(cè)試，具有的耐用性

在高 pH 條件下經(jīng) 20 個(gè)循環(huán)仍保持很好的柱效

色譜柱測(cè)試循環(huán)

第 1 步

24x 高 pH 沖洗步驟

流動(dòng)相： A：10mM 碳酸氫銨 (pH 10.5)

B：yi腈

梯度： B 在 6 分鐘內(nèi)從 5% 變成 95%，95%

B 保持 2 分鐘

重新平衡： 5% B 保持 2 分鐘

流速： 1.5mL/min

第 2 步

高 pH 測(cè)試

等度： 10mM 碳酸氫銨 (pH 10.5)/yi腈 (50:50)

檢測(cè)： UV / 230 nm

樣品： 1.

2.

丁卡因

ben海拉明

第 3 步

1x 中性沖洗步驟

流動(dòng)相： A：水

梯度： 5% B 保持 2 分鐘

B 在 3 分鐘內(nèi)從 5% 變成 100%，

100% B 保持 5 分鐘

第 4 步

中性 pH 測(cè)試

等度： 水/yi腈 (35:65)

流速： 1.0mL/min

檢測(cè)： UV / 254 nm

樣品：

ben乙酮

ben

甲ben

苊

第 5 步

24x 低 pH 沖洗步驟

Kinetex液相色譜柱-選擇性 - 固定相

pH 選擇性

Kinetex EVO C18 在很大的 pH 范圍內(nèi)都能展現(xiàn)出色的性能，利用此色譜柱，無(wú)論化合物官能團(tuán)的組成如何，您都可以變換色譜圖和操控保留順序。現(xiàn)在，是時(shí)候打破束縛，讓您的液相色譜大顯神通了。

選擇性 -Polar C18

Kinetex Polar C18 包含 C18 配體和極性基團(tuán)修飾的表面，以此來(lái)提升極性化合物保留能力并提高分離度。此外，這種固定相使用的gao級(jí)專(zhuān)有鍵合技術(shù)可以確保 100% 水溶性溶劑穩(wěn)定性和均衡的非極性化合物保留能力。這出色的通用型固定相適用于包含極性和非極性化合物的化合物混合物，甚至還可以用于包括類(lèi)似的化合物、雜質(zhì)或代謝物的單類(lèi)方法。Gemini色譜柱描述：1、建立pH方法開(kāi)發(fā)的標(biāo)桿2、持久耐用的反相HPLC色譜柱：在極端pH條件下能提供更長(zhǎng)的使用壽命以及卓越的穩(wěn)定性，使分析方法更重現(xiàn)、更gao效。

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷(xiāo)售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念，自強(qiáng)不息、開(kāi)拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專(zhuān)業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)平臺(tái)，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。 公司主營(yíng)：Luna色譜柱，美國(guó)飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類(lèi)手性色譜柱等等

Kinetex Polar C18 包含 C18 配體和極性基團(tuán)修飾的表面，以此來(lái)提升極性化合物保留能力并提高分離度。此外，這種固定相使用的gao級(jí)專(zhuān)有鍵合技術(shù)可以確保 100% 水溶性溶劑穩(wěn)定性和均衡的非極性化合物保留能力。這出色的通用型固定相適用于包含極性和非極性化合物的化合物混合物，甚至還可以用于包括類(lèi)似的化合物、雜質(zhì)或代謝物的單類(lèi)方。聚合物基質(zhì)-pH1-14-------------孔結(jié)構(gòu)復(fù)雜,孔徑不均勻?qū)е轮Р粔蚋?有ji溶劑可能導(dǎo)致聚合物基質(zhì)溶漲而受損lux（手性色譜柱）完整的手性分離方案從分析到制備級(jí)別，簡(jiǎn)化手性分離，均是明智的投入。

Luna液相色譜柱-Luna Phenyl-Hexyl(ben基-己基)

出色的穩(wěn)定性

Luna Phenyl-Hexyl(ben基-己基)柱使用重現(xiàn)性高和極穩(wěn)定的ben基相。

Luna液相色譜柱-Luna CN(qing基柱)

被證實(shí)的重現(xiàn)性

Luna CN (qing基柱)提供不同運(yùn)行，不同柱子，不同批次間的重現(xiàn)性色譜。Luna 高純度硅膠基質(zhì)有優(yōu)越的致密度，可以改善qing基鍵合技術(shù)，使得到一個(gè)穩(wěn)定的qing基鍵合相。

結(jié)果:

d 反相或正相條件下穩(wěn)定的 CN 柱

d 不同運(yùn)行，不同柱子，不同批次間的重現(xiàn)性

d 在 pH 值 1.5 至 7.0 范圍內(nèi)，保持酸堿穩(wěn)定

Luna液相色譜柱-Luna SCX

開(kāi)發(fā)強(qiáng)陽(yáng)離子交換方

Luna SCX 色譜柱為陽(yáng)離子化合物基質(zhì)提供ji佳的分離度和尖銳峰形。然而，由于多數(shù) SCX 色譜柱的峰形較差以及分離度不好，使許多色譜工作者忽略了用這一重要的固定相進(jìn)行小分子化合物的方法開(kāi)發(fā)。

d 分離含有陽(yáng)離子基質(zhì)和含氮化合物的混合物，分離度好峰形尖銳

d ben磺酸鍵合相提供混合模式共同改善二維多肽應(yīng)用分離

d 二維液相色譜應(yīng)用的理想之選