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脂肪酸具有長碳?xì)滏満鸵粋€羧基末端的有機(jī)化合物的總稱,和甘油結(jié)合生成脂肪,故名;是動物、植物和微生物脂質(zhì)的基本組成成分。在生物組織和細(xì)胞中游離形式的脂肪酸僅存痕量。從各種生物體中已分離出100多種脂肪酸。
目前檢測脂肪酸的手段主要包括紅外吸收光譜法、毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法、陰離子色譜法、Elisa法和氣質(zhì)聯(lián)用法。其中氣相色譜(GC-FID)和氣質(zhì)聯(lián)用發(fā)(GC-MS)測定反式脂肪酸具有寬的檢測范圍和較高的靈敏度,是較為準(zhǔn)確、可靠的分析方法。
華士特生物采用GC-MS建立37種長鏈脂肪酸,8種短鏈脂肪酸的定量檢測方法。歡迎咨詢送檢。
華士特脂肪酸定量 檢測方法:
1、樣品提取
稱取適量樣品,加入4mL的1醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,搖勻;恒溫在30℃以下超聲抽提10min。取出離心管,放于離心機(jī)中離心(1800rpm,10min),收集上清液,重復(fù)3次;將萃取液在柔和氮氣流下吹干。
2、萃取液的皂化
加入3mL 6%KOH的1醇溶液(配制:6gKOH/1醇118mL左右),超聲10min,放置30min,重復(fù)3次,室溫放置過夜(瓶蓋蓋緊)進(jìn)行堿水解;加入2mL正己烷,超聲10min,搖勻,震蕩離心,棄除上層正己烷萃取液,重復(fù)3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入約1mL 4N的HCl使pH<2,再用2mL正己烷萃取3次。
3、脂肪酸的衍生化
將上述萃取液,轉(zhuǎn)移到帶蓋玻璃管中,用氮氣吹干后,加入約2mL BF3-MeOH,玻璃管上空間沖入氮氣后蓋蓋密閉,于90℃下加熱2h;待樣品冷卻后,加入5%NaCl溶液約1ml,用2ml正己烷萃取3次,并將萃取液轉(zhuǎn)移到2mL進(jìn)樣瓶中,氮氣吹干,待分析。
4、色譜條件
色譜柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25μm
升溫程序:80度起始溫度,保持1分鐘;10度/min升溫到200度,5度/min升溫到225度,2度/min升溫到250度,保持5min。
MS,EI源。
華士特生物擁有專業(yè)的脂肪酸檢測技術(shù)團(tuán)隊,該多年來專注于天然化合物成分的分離與檢測,研究過的生物資源超過上百種,涵蓋動物,植物,微生物等領(lǐng)域,積累了豐厚的經(jīng)驗。華士特生物所提供的檢測服務(wù)包括各種樣品的生物活性成分檢測,營養(yǎng)成分檢測以及靶向定量檢測。公司檢測的脂肪酸含量檢測方法具有準(zhǔn)確高、重復(fù)性好等多種優(yōu)勢。