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山東亞細(xì)胞定位電話,武漢思特進(jìn)公司

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發(fā)布時(shí)間:2020-08-09 03:46  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。本課題以六種紫色蔬菜(紫洋蔥、紫甘藍(lán)、羽衣甘藍(lán)、紫山藥、紫薯、紫紅薯)為試材,系統(tǒng)研究了蔬菜中花色苷的前處理方法、定性定量及活性篩選方法,旨在為開發(fā)利用紫色蔬菜中豐富的花色苷資源提供方法和技術(shù)支撐。





重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-type ATPase(HMA)已被證實(shí)參與植物體內(nèi)的重金屬運(yùn)輸,HMA5主要參與銅的轉(zhuǎn)運(yùn)。在模式植物擬南芥、水稻和黃瓜中對(duì)HMA5基因進(jìn)行了較多的研究,但是對(duì)豆科植物HMA5的研究鮮見報(bào)道。實(shí)驗(yàn)室前期在天藍(lán)苜蓿中分離到一個(gè)與銅脅迫及共生結(jié)瘤相關(guān)的HMA5基因,為了對(duì)此類基因在豆科植物共生結(jié)瘤中的作用進(jìn)行深入研究,本研究對(duì)全基因組已測序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因組進(jìn)行篩查,尋找HMA5同源基因并通過表達(dá)模式分析初步判斷其與共生結(jié)瘤的關(guān)系,在此基礎(chǔ)上,以其中的MTR_8g079250基因?yàn)閷?duì)象,進(jìn)行亞細(xì)胞定位、組織表達(dá)、RNA干擾和過量表達(dá)等研究,初步鑒定該基因在共生結(jié)瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亞細(xì)胞定位構(gòu)建MTR_8g079250的洋蔥表皮亞細(xì)胞定位載體,通過基因槍轟擊轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,在激光共聚焦顯微鏡下觀察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在細(xì)胞膜上表達(dá),在細(xì)胞核上也有微量的表達(dá);構(gòu)建MTR_8g079250的葉片亞細(xì)胞定位載體,通過根癌農(nóng)介導(dǎo)注射葉片的方式進(jìn)行轉(zhuǎn)化,結(jié)果表明目的基因主要定位在細(xì)胞膜和細(xì)胞核上;生物信息學(xué)分析顯示,ScBG1基因DNA序列全長1175bp,編碼332個(gè)氨基酸,含有1個(gè)長度為156bp的內(nèi)含子。2、MTR_8g079250的組織表達(dá)構(gòu)建PMTR_8g079250::GUS融合表達(dá)載體,通過農(nóng)發(fā)根轉(zhuǎn)化的方式轉(zhuǎn)入蒺藜苜蓿根部,經(jīng)培養(yǎng)后,進(jìn)行GUS染色觀察。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);根據(jù)已報(bào)道的Δ8-脂肪酸脫氫酶基因設(shè)計(jì)引物,分別從小眼蟲藻基因組DNA和cDNA中擴(kuò)增得到該基因片段,序列分析表明:結(jié)構(gòu)基因長1266bp,編碼421個(gè)氨基酸??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途徑中較為關(guān)鍵的催化酶之一,被稱為是植物中無機(jī)態(tài)N轉(zhuǎn)化為有機(jī)態(tài)N的“門戶”,對(duì)植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有著極為重要的影響。高等植物中的GS同工酶主要分為兩類:胞質(zhì)型GS1主要同化從土壤吸收的初級(jí)氨及再同化從植物體內(nèi)各個(gè)N循環(huán)途徑所釋放的氨;質(zhì)體型GS2同化由NO3--N還原而來及光呼吸過程所釋放的氨。N素供應(yīng)對(duì)甜瓜的生長發(fā)育、果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)形成有非常重要的影響,目前甜瓜N素代謝研究還停留在N營養(yǎng)生理與果實(shí)品質(zhì)及產(chǎn)量層面,在分子機(jī)理水平的研究報(bào)道很少,尤其是對(duì)與N素同化和利用效率緊密相關(guān)的GS酶基因的研究還是空白。因此,本文以甜瓜作為對(duì)象,在從甜瓜中出胞質(zhì)型GS基因M-GS1的基礎(chǔ)上,對(duì)M-GS1及課題組到的甜瓜質(zhì)體型GS基因M-GS2的基因組拷貝數(shù)、表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及生化特性、在甜瓜中的表達(dá)調(diào)控特征等進(jìn)行了研究和對(duì)比分析,從基因、蛋白質(zhì)和細(xì)胞水平對(duì)甜瓜GS基因進(jìn)行了系統(tǒng)的功能驗(yàn)證和鑒定,開展了甜瓜N營養(yǎng)代謝的分子生理研究;進(jìn)而在植株水平研究M-GS1在轉(zhuǎn)基因超量表達(dá)后提高植株N素同化效率的潛能,為甜瓜GS基因的應(yīng)用、利用GS基因改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依據(jù)。這樣,若在熒光顯微鏡下看到細(xì)胞內(nèi)某一部位存在GFP信號(hào),說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位,這樣就達(dá)到了確定某物質(zhì)亞細(xì)胞定位的目的。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);多胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白能夠特異性介導(dǎo)多胺類物質(zhì)跨膜運(yùn)輸,在調(diào)節(jié)多胺濃度、調(diào)控抗性基因表達(dá)、維持mRNA水平、增強(qiáng)植物抗逆性等方面具有重要功能??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





以擬南芥金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體基因AtZIP1(GenBank登錄號(hào):AAC24197)的氨基酸序列為信息探針,從水稻(Oryza sativa L.)中分離得到OsZIP7a和OsZIP8兩個(gè)鋅鐵轉(zhuǎn)運(yùn)體基因,OsZIP7a和OsZIP8分別編碼384和390個(gè)氨基酸殘基的產(chǎn)物。OsZIP7a和OsZIP8與ZIP家族成員有著高度的同源性,均包含8個(gè)跨膜區(qū),有著高度保守的ZIP結(jié)構(gòu),在第3和第4跨膜區(qū)之間存在一個(gè)可變區(qū),可變區(qū)富含組氨酸。半定量RT-PCR分析結(jié)果表明,OsZIP7a和OsZIP8在水稻根、莖、葉和幼穗等組織中均呈低水平表達(dá);在缺鐵處理時(shí),OsZIP7a基因在水稻幼苗根部的表達(dá)量增多,而在地上部的表達(dá)未明顯增多;在缺鋅處理的水稻幼苗中,OsZIP8基因的表達(dá)量顯著增多。構(gòu)建OsZIP7a::GFP瞬時(shí)表達(dá)載體,采用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,結(jié)果表明,OsZIP7a::GFP定位于洋蔥表皮細(xì)胞的質(zhì)膜上。構(gòu)建酵母表達(dá)載體pFL61-OsZIP7a和pFL61-OsZIP8,利用醋酸鋰方法分別轉(zhuǎn)入酵母雙突變株fet3fet4DEY1453和zrt1zrt2ZHY3中,設(shè)pFL61空載體為陰性對(duì)照,分別在低鐵和低鋅的酵母YPD培養(yǎng)基中進(jìn)行酵母功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)。正胡蘿卜含有豐富的胡蘿卜素、花青素、番茄紅素、核黃素、蛋白質(zhì)、碳水化合物及人體所需的多種微量元素,可增強(qiáng)視力、防治心臟病、清除氧自由基、血壓、等。


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