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下面是由北京旭鑫盛科發(fā)布內(nèi)容,如有需要,歡迎新老客戶蒞臨!
組織研磨儀進行操作的基本流程如下:
1. 將菠菜組織樣本分裝到合適的離心管內(nèi);
2. 在離心管內(nèi)添加適量裂解介質(zhì);
3. 添加一定量的溶劑;
4. 將離心擰緊蓋子,本插入適配器中;
5. 再使用適配器放置到高通量組織研磨儀,并擰緊固定手柄;
6. 設(shè)置研磨速度和時間,啟動開關(guān);
組織研磨儀產(chǎn)品特點
1. 垂直振蕩:穩(wěn)度大,樣品破碎徹底;
2. :2分鐘內(nèi)完成樣品破碎;
3. 通量高:一次*多處理2×96個樣品;
4. 處理量大:2×50ml鋼罐可破碎大體積的樣品;
5. 適配器范圍廣:2×96×2ml適配器、2×48×2ml適配器、 2×24×5ml適配器、2×10×7ml適配器可自由選擇;
6. 安全性高:具備安全門及安全鎖;
7. 無交叉污染:樣品管在破碎過程中處于全封閉狀態(tài),避免交叉污染;
8. 低噪音:儀器運行過程中,噪音小于70dB,不會對其它實驗或儀器產(chǎn)生干擾。
以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對同行業(yè)有所幫助!
每50~100mg 組織加入0.2體積 TRIzol
1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù):12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,蓋緊管蓋,手動劇烈震搖15 秒鐘,然后室溫靜置2~3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相(無色)加入到新試管中,同時計算所吸取的水相體積。不必過多吸取,防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)(中間層,白色)。
5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳,蓋緊管蓋,輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘,待RNA 充分沉淀(為減少RNA 降解,此步驟可省略)。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),每管加入0.2體積75%乙醇潤洗,蓋緊管蓋,輕輕晃動試管,以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),打開管蓋,將RNA 沉淀干燥(室溫?fù)]發(fā)或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進一步實驗,或者-70℃保存。