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組織研磨機(jī)的工作原理
組織研磨機(jī)是一款名副其實(shí)的實(shí)驗(yàn)室多功能樣品制備儀器,是專門為“少量樣品”而推出的新產(chǎn)品。5)將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800,設(shè)定研磨時(shí)間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié),此數(shù)據(jù)是以銀杏為樣本得出)。高通量組織研磨機(jī)可在1-3分鐘內(nèi)對(duì)硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速有效的干磨或濕磨,亦可達(dá)到對(duì)粉體及混濁液混合、均相化的目的,還可以進(jìn)行低溫液氮冷凍研磨,也可以進(jìn)行生物細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取。高通量組織研磨機(jī)可研磨的樣品種類包括:植物組織、動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢和酵母等。
組織研磨機(jī)的詳細(xì)介紹
以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對(duì)同行業(yè)有所幫助!
組織研磨機(jī)具有對(duì)稱的一對(duì)高速大振幅的搖臂,研磨罐在水平方向上進(jìn)行高頻鐘擺式振動(dòng),研磨球在慣性的帶動(dòng)下以高能量反復(fù)撞擊及摩擦,從而達(dá)到粉碎研磨的效果。
研磨罐的運(yùn)動(dòng)是與罐內(nèi)研磨球的運(yùn)動(dòng)進(jìn)行疊加,將樣品充分混合。混合效果可以通過使用多個(gè)不同直徑的小研磨球來得到進(jìn)一步的提高,高通量組織研磨機(jī)研磨時(shí)使用多個(gè)不同直徑的小研磨球可以大大提高樣品的均混度。組織研磨機(jī)的詳細(xì)介紹以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對(duì)同行業(yè)有所幫助。生物細(xì)胞就可以通過使用大量小球(如瑪瑙球)進(jìn)行細(xì)胞破壁。球與球之間的巨大撞擊和摩擦可有效地實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的破壁。
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每50~100mg 組織加入0.2體積 TRIzol
1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù):12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,蓋緊管蓋,手動(dòng)劇烈震搖15 秒鐘,然后室溫靜置2~3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相(無色)加入到新試管中,同時(shí)計(jì)算所吸取的水相體積。不必過多吸取,防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)(中間層,白色)。
5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳,蓋緊管蓋,輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘,待RNA 充分沉淀(為減少RNA 降解,此步驟可省略)。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),每管加入0.2體積75%乙醇潤洗,蓋緊管蓋,輕輕晃動(dòng)試管,以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),打開管蓋,將RNA 沉淀干燥(室溫?fù)]發(fā)或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),或者-70℃保存。