低溫生物菌種的實驗器材

細菌、酵母菌，霉菌。肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基，滅菌脫脂牛乳，滅菌水，化學(xué)純的液體石蠟，甘油，河沙，瘦黃土或紅土、鹽，干冰，95%酒精，10%鹽酸，無水氯化鈣。滅菌吸管，滅菌滴管，滅菌培養(yǎng)皿，管形安瓿管，淚滴形安瓿管（長頸球形底），40目與 100目篩子，油紙，濾紙條（0.5×1.2cm），干燥器，真空泵，真空壓力表，噴燈，L形五通管，冰箱，低溫冰箱（-30℃），液氮冷凍保藏器。

低溫生物菌種的篩選分離

篩選：工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩，挑選具有某種能力的有用菌種。

分離：首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細菌、霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)一定時間，平皿上長出的許多單個菌落（單一微生物的集落）經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株，簡稱純種，移種至試管斜面培養(yǎng)基上，置4℃冰箱備用。

篩選模型：根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選菌種的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗菌生長的菌種物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，測定發(fā)酵液或菌絲體內(nèi)菌種的含量，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對所提取的菌種進行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗及臨床試驗等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。

                                                       低溫生物菌種的冰凍是怎樣的？

生物體的新陳代謝是隨著溫度的降低而減緩的。如果低溫在0℃以上，這個減緩過程一般是可逆的，即溫度回升以后，新陳代謝的速度也隨之恢復(fù)。但如溫度降至冰點以下時，生物體常因結(jié)冰而發(fā)生不可恢復(fù)的損傷。因為所有的生物體體液都含有大量的水（一般在80%左右），細胞器也都懸浮于水溶液中，新陳代謝過程都是在水溶液或膜和水溶液的界面上進行的，所以在結(jié)冰的過程中，一方面由于水的晶體──冰晶硬度較大，對于生物體內(nèi)的精細結(jié)構(gòu)會造成機械損傷；另一方面由于水結(jié)冰，使細胞內(nèi)失去了大量可利用的水，造成脫水現(xiàn)象，從而使精細結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞。