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1.5MTris
所用原料是西南制藥-廠的產(chǎn)品。所用升華器為常見樣式, 唯上下兩部改用玻璃磨口連接。冷凝器用流水冷卻。.高溫高壓滅菌后,室溫保存。 注意:應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。1.5 M Tris-HCl (pH8.8)組份濃度 1.5 MTris-HCl 配制量 1 L 配制方法1.稱量181.7 g。
Tris-HCl緩沖液優(yōu)點堿性較強(qiáng),可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液;對生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。Tris-HCl緩沖液缺點pH受濃度影響較大,稀釋10倍,pH變化大于0.1溫度效應(yīng)大,除了Tris-HCl之外,tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl NaCl KCl,常用于清洗染色的組織或Western Blotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl NaCl tween20,做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl EDTA,對DNA的堿基有保護(hù)性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存;TAE=Tris base 乙酸 EDTA,是大片段DNA短時間電泳時廣泛使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase 硼酸 EDTA,適用于長時間DNA電泳,對較小片段分離效果較好。
查驗]
酸堿度取三羥甲基羥基甲烷1.0g,
放水20ml融解后,依法測量,pH值應(yīng)是10.
0~11.5。溶液的澄清度與顏色取三羥甲基羥基甲烷2.
5G,更換沸放冷的水50ml融解后,依法查驗,溶液應(yīng)澄清,基本上沒有顏色。如顯混濁,與2號渾濁度規(guī)范液較為,不可更濃。氟化物取溶液的澄清
度與顏色項下的溶液10ml,依法查驗(細(xì)則0801),與規(guī)范氧化鈉溶液5.0Ml做成的對比液較為,不可更濃(0.
01%)。