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目前,大腸菌群檢測(cè)方法發(fā)展很快,已提高到分子生物學(xué)水平,使檢測(cè)更快速、準(zhǔn)確。酶底物法以其操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)周期短,將取代多管發(fā)酵法、濾膜法等傳統(tǒng)方法,尤其是酶底物法采用密封培養(yǎng)技術(shù),在檢測(cè)醫(yī)院污水時(shí)可以減少人員接觸而降低檢測(cè)人員的致病風(fēng)險(xiǎn),因此具有更強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值,正是目前水中糞大腸菌群的快速檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法之一。
固定底物酶底物法(Defined Subsrate ?Technology, DST,以下簡(jiǎn)稱(chēng)DST-酶底物法)采用大腸菌群細(xì)術(shù)能產(chǎn)生P-半乳糖苷酶(P-D-gaUctosUlase)分解鄰硝ji苯P-D-半乳吡喃糖苷0NPG(Ortho-Uropheny-p-D-galaclopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色,以及大腸埃希氏菌產(chǎn)生P-葡萄糖醛酸酶(p-glucimmidase)分解MUG使培養(yǎng)液在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來(lái)判斷水樣中是否含有大腸菌群、糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)及大腸埃希氏菌。該方法與傳統(tǒng)多管發(fā)酵法相比具有以下優(yōu)點(diǎn):可以采用成品的培養(yǎng)基及試劑,操作方便;密封培養(yǎng);無(wú)二次污染;實(shí)驗(yàn)用品易于集中無(wú)害化處理;無(wú)需確認(rèn)試驗(yàn);DST-酶底物法監(jiān)測(cè)時(shí)間較短,18?24h即可同時(shí)判斷水樣中糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)的MPN值酶底物法。且多管發(fā)酵法每升水樣中較低檢出限為2個(gè)糞大腸菌群,而固定底物酶底物法卻能抑制200萬(wàn)個(gè)異樣細(xì)菌,準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)到1個(gè)糞大腸菌群,具有更高的監(jiān)測(cè)靈敏性和更寬的監(jiān)測(cè)范圍。
在現(xiàn)在已知的大腸桿菌檢測(cè)方法中,酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測(cè)的先進(jìn)方法。這也就直觀的影響到了很多檢測(cè)人員對(duì)于酶底物法檢測(cè)水中大腸桿菌的方法的掌握,因?yàn)槿绻褂脗鹘y(tǒng)的多管發(fā)酵法和濾膜法的話,整體的操作過(guò)程比較繁瑣,并且是試驗(yàn)環(huán)境要求比較高。檢測(cè)時(shí)間比較長(zhǎng),所以酶底物法是現(xiàn)在追捧的檢測(cè)的水中大腸桿菌的方法。
那其實(shí)從整個(gè)客觀角度來(lái)說(shuō),相對(duì)于多管發(fā)酵和濾膜法,酶底物法檢測(cè)步驟大大減少,而且對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高,檢測(cè)時(shí)間可減少到24小時(shí),在日常水樣監(jiān)測(cè)及應(yīng)急監(jiān)測(cè)中具有很好的應(yīng)用前景,可及時(shí)檢測(cè),預(yù)防,較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。酶底物法有商品化試劑供應(yīng),實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便,無(wú)需確認(rèn)試驗(yàn),可同時(shí)檢測(cè)水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌。