【廣告】
武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
NT-proBNP是BNP激1素原分裂后沒有活性的N-末端片段,與BNP相比,半衰期更長(zhǎng),更穩(wěn)定,其濃度可反映短暫時(shí)間內(nèi)新合成的而不是貯存的BNP釋放,因此更能反映BNP通路的激1活。1血漿NT-proBNP水平隨心衰程度加重而升高。50歲以下的成人血漿NT-proBNP濃度450pg/ml診斷急性心衰的敏感性和特異性分別為93%和95%;50歲以上的人血漿濃度900pg/ml診斷心衰的敏感性和特異性分別為91%和80%。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
通常我們可用于ELISA檢測(cè)的樣本是有多種類型的,如血1清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的步,下面簡(jiǎn)單介紹一下不同類型的樣本的處理方法。機(jī)體被微生物感1染后,先產(chǎn)生IgM抗1體,然后產(chǎn)生IgG抗1體。1、 血1清
血1清是1常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡(jiǎn)單。
用無熱原、無內(nèi)毒1素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,使血1清析出。(1好將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血1清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度。建議將血1清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
但是這種特異性也不是絕1對(duì)的。假使兩種化合物有著部分相同的結(jié)構(gòu),在抗原抗1體反應(yīng)中可出現(xiàn)交叉反應(yīng)。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗1體上的結(jié)合位點(diǎn),標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的生物素化抗1體愈少,最后的顯色也愈淺,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。例如:絨毛膜促性1腺激1素(hCG)和黃體生成激1素(LH)均由α和β兩個(gè)亞單位組成,其結(jié)構(gòu)的不同處在β亞單位,而兩者的α亞單位是同類的。用hCG免疫動(dòng)物所得的抗血1清中含有抗α-hCG和抗β-hCG兩種抗1體,抗α-hCG抗1體將與LH中的
α酶位發(fā)生交叉反應(yīng)。在臨床檢驗(yàn)中,如用抗hCG抗血1清作為妊1娠診1斷試劑檢定尿液中hCG,只能用于hCG濃度較高的試驗(yàn),否則婦女生理性排泄入尿液中的微量LH將與之發(fā)生交叉反應(yīng)。(2)有些混合固定液的成份之間會(huì)發(fā)生氧化還原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定時(shí)就沒有作用了。因此在作為早1孕診斷(敏感度應(yīng)達(dá)到50mIu/mlhCG)的實(shí)際中必須應(yīng)用只對(duì)hCG特異的抗β-hCG,以避免與其它激1素的交叉反應(yīng)的發(fā)生。
4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗1體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。ELISA試劑盒代測(cè)服務(wù)一、適合客戶1、沒有時(shí)間和精力完成生化測(cè)定的客戶。如抗1體的來源為抗血1清,包被和酶標(biāo)用的抗1體1好分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克1隆抗1體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗1體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。