在氣液色譜和液液色譜中作為固定相的液體稱為固定液。在氣液色譜中,這種液體固定相又稱為液相(liquid phase)。
固定液的要求:1、揮發(fā)性小,操作溫度下有較低蒸氣壓,以免流失2、熱穩(wěn)定性好,操作溫度下不發(fā)生分解和聚合反應,并且液體狀態(tài),保持固定液原來的特性3、對試樣有一定的溶解能力,以免被測組分被帶走起不到分配作用4、具有良好的選擇性,即操作條件下,對沸點相近或者性質(zhì)相似的不同物質(zhì)有盡可能高的分離能力5、化學穩(wěn)定性好,不與被測組分,擔體,載氣發(fā)生化學反應
酒精-福爾0馬林固定液福爾0馬林2~6(6~10)ml 70%酒精100ml固定植物一般組織,尤其適用于萌發(fā)的花粉管的固定。通常固定24h,亦可長久保存。2.24.5 酒精-福爾0馬林-甘油固定液95%酒精150ml 5%福爾0馬林100ml 甘油50ml此液也可長期儲存材料。
鉻酸-醋酸-福爾0馬林混合液這3種藥品混合在一起所配成的各種固定液,通常稱納瓦興固定液(Nawashin fixative),簡稱Craf。
固定的作用:組織經(jīng)一系列的處理后,就必須進行固定,當然有的組織是先固定,再進行處理,然后再固定。固定的作用,從組織學的角度其簡單的定義是,保持細胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構,使之盡量保持細胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構,而從組化技術的角度,固定的作用不僅是使細胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固,盡量減少或終止外源性酶和內(nèi)源性酶的反應;防止細胞的自溶,以免使抗原擴散至組織間質(zhì);以保持組織的固有形態(tài)和結(jié)構;更重要的是保持組織或細胞的抗原性,不但要使抗原不導致失活,而且不使抗原發(fā)生彌散的現(xiàn)象,才能在組化染色時,不產(chǎn)生過深的背景,影響對陽性物的判斷。

好的固定液還是丙0酮。因為如果使用福爾0馬林固定液、石蠟切片顯示酸堿磷酸酶就顯示不好,病毒的包函體就會消失掉,又如醋酸,它對膠原纖維等有膨脹的作用。由于各種固定液對不同的組織有不同的作用,因此許多將根據(jù)各種固定液的優(yōu)缺點,配制出許多混合液的方法來,給組織的良好固定起到了非常積極的作用。但是,值得指出的是并非所有的固定液都不是十全十美的,例如,酒精、甲醛、醋酸固定液,對組織固定很好,組織中各物質(zhì)的染色也十分清晰,但對固定脫水盒為銅質(zhì)的組織時,效果就不好,原因是醋酸跟酮可發(fā)生反應,產(chǎn)生醋酸銅,沉淀于組織中,可造成對抗原的損害,對于組織化學的顯示,經(jīng)實驗證明:可呈弱陽性乃至陰性。由此可見,固定液的選擇正確與否決定著對某些病例的組化標記的成敗關鍵。在我們的日常工作科研中,對于組織的固定,應有針對性的選擇,方能獲得滿意的效果。