固相萃取柱規(guī)格填料的選擇

固相萃取柱填料可以保證持續(xù)一致的填料粒徑和比表面積，確保小柱高的回收率，每支、每批之間高的穩(wěn)定性與重現(xiàn)性。

對(duì)于反相、正相和吸附型固相萃取柱來說，被萃取樣品的質(zhì)量不要超SPE 柱填料的5 %（同一種吸附劑對(duì)不同目標(biāo)物的選擇性不同。此數(shù)值僅供參考?。浑x子交換型的固相萃取柱，須考慮離子交換的容量。

固相萃取柱有哪些分類

SPE固相萃取的核心在于填料，即吸附劑。根據(jù)吸附劑的不同，固相萃取柱可大致分為以下三類：

1、正相固相萃取固定相（填料）：極性物質(zhì)。分離對(duì)象：極性、中等極性、非極性流動(dòng)相（洗脫劑）：非極性、中等極性吸附劑與化合物間作用力：氫鍵，π—π鍵等常用正相固相萃取柱：①極性官能團(tuán)鍵合硅膠如-CN，-NH2；②極性吸附物質(zhì)如Silica、Florisil、Alumina

2、反相固相萃取固定相：非極性分離對(duì)象：中等到非極性物質(zhì)流動(dòng)相：極性（水溶液）或中等極性吸附劑與化合物間作用力：范德華力或色散力常用反相固相萃取柱：十八烷基鍵合硅膠（C18柱）

3、離子交換固相萃取固定相：帶電荷物質(zhì)分離對(duì)象：帶電荷的化合物（水溶液、有機(jī)溶液）流動(dòng)相：去離子水、高或低離子強(qiáng)度溶液吸附劑與化合物間作用力：靜電吸引可分為兩種：①陰離子交換：脂肪族季銨類鹽鍵合硅膠，如SAX、NH2；②陽(yáng)離子交換：磺酸基，如SCX，羧酸基團(tuán)如WCX

固相萃取柱操作問題

1、裝柱柱子下的活塞避免使用潤(rùn)滑劑，以免被淋洗劑帶到產(chǎn)品中。干法和濕法裝柱區(qū)別較小，只要能把柱子裝實(shí)即可。裝柱前應(yīng)仔細(xì)觀察固相萃取柱是否開裂，避免影響分離效果，裝柱應(yīng)該要適度緊密（太緊密淋洗劑流速太慢，太疏松淋洗劑流速過快）、均勻（避免樣品從一側(cè)斜著流出），避免過柱時(shí)出現(xiàn)大量的氣泡。

2、加樣用少量的溶劑溶樣品加樣，打開活塞，待溶劑層下降至石英砂面時(shí)，再加少量的低極性溶劑，然后再打開活塞，如此三次，一般石英變成白色。加入淋洗劑后不可立即加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有分開2cm～4cm，再加壓，這樣可以避免溶劑夾帶樣品快速下行。

3、樣品的收集用硅膠作固定相過柱子的原理是一個(gè)吸附與解吸的平衡過程。如果樣品與硅膠的吸附較強(qiáng)，樣品解析較慢。這樣就會(huì)出現(xiàn)后面的點(diǎn)先出，而前面的點(diǎn)后出的現(xiàn)象，這時(shí)可以采用氧化鋁作固定相。另外，收集的試管大小要以樣品量而定，特別是小量樣品，如果用大試管，可能一根就收到了多個(gè)樣品，如果都用小試管，缺點(diǎn)是工作量太大。

4、處理萃取柱分離后，由于使用了大量的溶劑，其中的雜質(zhì)也會(huì)積累到所需組分中，必要時(shí)進(jìn)行重結(jié)晶。另外，過柱時(shí)有時(shí)會(huì)出現(xiàn)氣泡，這可能存在兩種原因：一是這與使用的溶劑類型有關(guān)，如果是易揮發(fā)的溶劑，在室溫稍高的情況下，很容易出現(xiàn)這種現(xiàn)象。因此，在室溫高的時(shí)候，應(yīng)該選擇沸點(diǎn)較高，揮發(fā)性相對(duì)小的溶劑。使用混合溶劑時(shí)，使用的兩種溶劑的沸點(diǎn)相似。二是在裝柱之前，柱內(nèi)可能存有少量空氣，必須用加壓的方式將空氣排干，這樣就可避免柱中存有空氣。

使用固相萃取柱時(shí)應(yīng)注意的影響因素

吸附劑的選擇∶實(shí)驗(yàn)時(shí)盡量選擇與目標(biāo)化合物極性相似的吸附劑，其用量大小與目標(biāo)物性質(zhì)（極性、揮發(fā)性）及其在水樣中的濃度直接相關(guān);吸附劑盡量是多孔、比表面積大的固體顆粒，表面積越大，吸附能力越強(qiáng)，但是相應(yīng)孔徑會(huì)減小，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況綜臺(tái)考慮﹔吸附劑必須具有較小的空白值，以減少吸附劑引起的污染和干擾;萃取吸附過程必須可逆并且具有較高的回收率，吸附劑必須能夠快速地吸附分析物，并且能夠在適當(dāng)?shù)娜軇l件下快速釋放分析物，同時(shí)具有恒定的回收率，保證整個(gè)分析結(jié)果更加可靠、準(zhǔn)確;吸附劑必須要具有很好的化學(xué)穩(wěn)定性，具有較強(qiáng)的耐酸堿腐蝕能力，在各種淋洗劑條件下不會(huì)發(fā)生溶脹作用;吸附劑必須與樣品溶液表面有很好的界面接觸，只有樣品與吸附劑表面充分接觸才能夠保證定量萃取。