【廣告】
全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提
菌株的鑒定:對篩選得到的乳酸菌進(jìn)行16S rDNA序列分析,確定其種屬。將活化好的菌液,進(jìn)行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16],然后對基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增,上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′,下游引物1492R序列:5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′,擴(kuò)增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL:10×buffer 5 μL;脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL;可誘發(fā)植物自身的抗病潛能提高增強(qiáng)植物的抗病性,促使植物自身大量分泌生,從而促進(jìn)植物的生長繁殖,增產(chǎn)增收。上游引物(25 μmol/L)0.5 μL;下游引物(25 μmol/L)0.5 μL;Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL;模板DNA 1.5 μL ;ddH2O 37 μL。PCR擴(kuò)增條件為:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反應(yīng)步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度及濃度,將達(dá)到測序要求的擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海華大基因進(jìn)行測序,將測序結(jié)果在美國國立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進(jìn)行比對,并確定其種屬。
分泌物質(zhì):產(chǎn)生低分子量以及蛋白或多肽等活性物質(zhì)
分泌物質(zhì):產(chǎn)生低分子量以及蛋白或多肽等活性物質(zhì),抑制植物病原菌,并且可作為根圍細(xì)菌促進(jìn)植物生長。但Jerzsele等[35]的研究表明:解淀粉芽孢桿菌對人工產(chǎn)氣莢膜梭菌而引起的肉雞壞死性的無顯著效果,說明不同的解淀粉芽孢桿菌菌株抑菌能力和作用效果存在差異。通過非核糖體途徑合成分子量小熱穩(wěn)定性好、含有D-氨基酸、耐受蛋白酶水解以及作用的脂肽類,在生物防治應(yīng)用中對植物病原細(xì)菌、真菌、病毒、線蟲的抑制起到主要作用。
拮抗作用:微生物通過同化作用產(chǎn)生物質(zhì)抑制有害病原物的生長或發(fā)展或直接殺滅病原物。與病原菌直接作用。除了產(chǎn)生素等次級代謝產(chǎn)物外,還會產(chǎn)生一系列對病原菌抑制起到重要作用的胞外水解酶。
解淀粉芽孢桿菌在果蔬保鮮上的應(yīng)用
果蔬的保鮮很大程度決定于對果蔬表面有害生物的抑制。在過去的20多年里,生物制劑作為一種防治采后果實(shí)腐爛的有效方法而涌現(xiàn)出來。解淀粉芽孢桿菌生Lx-11致病性測定,60億活芽孢/mL解淀粉芽孢桿菌Lx-11懸浮劑經(jīng)小鼠經(jīng)口、吸入、注射(靜脈)致病性試驗(yàn)均屬無致病性。范青等研究解淀粉芽孢桿菌B-912對桃和油桃褐腐病以及對柑橘果實(shí)采后青、綠霉病的抑制效果后認(rèn)為,解淀粉芽孢桿菌的抑菌機(jī)理為產(chǎn)生素從而抑制病菌的生長。
解淀粉芽孢桿菌已被證實(shí)對果蔬病原菌具有防治作用,而且解淀粉芽孢桿菌應(yīng)用于果蔬采后病害防治有很多優(yōu)點(diǎn),但到目前為止,能夠進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)的解淀粉芽孢桿菌菌株卻很少。其原因主要有:1)部分解淀粉芽孢桿菌防效不穩(wěn)定,容易受到環(huán)境影響;2)相對于化學(xué),解淀粉芽孢桿菌抑菌譜較窄;3)生產(chǎn)成本相對過高;4)解淀粉芽孢桿菌的安全性問題。只有克服這些缺陷,解淀粉芽孢桿菌才能在果蔬保鮮方面成為重要的殺菌保鮮劑。經(jīng)尿素施肥后再添加檸檬酸廢水的發(fā)酵菌液可降低蔬菜中和鹽含量,且對維生素C含量無影響。
解淀粉芽孢桿菌作為新的益生菌添加劑具有廣闊的應(yīng)用前景
目前,國內(nèi)外研究人員對關(guān)于從植物及土壤中分離鑒定得到不同解淀粉芽孢桿菌菌株的報(bào)道較多,并且進(jìn)一步分析研究了其代謝產(chǎn)物,發(fā)現(xiàn)對多種植物病原真菌及細(xì)菌有較好的抑制效果;也有不少學(xué)者從動物糞便及腸道中分離得到新的解淀粉芽孢桿菌,并將其作為益生菌添加劑添加到飼糧中用于動物生產(chǎn),有較好抑制致病菌的效果,提高動物生產(chǎn)。解淀粉芽孢桿菌作為新的益生菌添加劑具有廣闊的應(yīng)用前景,有必要進(jìn)一步篩選出更適宜在飼糧中添加的新,使其能作為益生菌在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中廣泛應(yīng)用。產(chǎn)品理化性質(zhì)及質(zhì)量控制指標(biāo):該產(chǎn)品生產(chǎn)是通過微生物(解淀粉芽孢桿菌生Lx-11)生物發(fā)酵獲得,解淀粉芽孢桿菌分散在發(fā)酵培養(yǎng)液中,為發(fā)酵后直接利用。另外目前關(guān)于其抑菌機(jī)理及促生長等方面的報(bào)道并不多,因此還需要進(jìn)一步進(jìn)行深入研究,在分子及基因水平闡述作用機(jī)理。