等溫核酸試劑盒

檢測(cè)方法

1電泳檢測(cè)

2熒光檢測(cè)

3側(cè)向流試紙條檢測(cè)

DNA R&D KITTwistAmp Basic酶和必要試劑

客戶提供引物和模板Twirla

TwistAmp exo

適用于real-time熒光探針檢測(cè)Twista,T16

TwistAmp nfo（核酶）

適用于末端三明治法檢測(cè)DNA擴(kuò)增反應(yīng)側(cè)向流試紙方法

Twirla

試劑盒

自PCR技術(shù)誕生以來(lái)已經(jīng)有三十年了。從經(jīng)典PCR、實(shí)時(shí)定量PCR再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR，這一技術(shù)在不斷蛻

變卻從未淡出我們的視野。近年來(lái)，等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的興起無(wú)疑是對(duì)PCR的巨大挑戰(zhàn)。

等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的基因快速診斷方法,涉及生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域,具體是用體外生物檢測(cè)試劑快速檢測(cè)病原微

生物的一種技術(shù)。

包括如下步驟:一、對(duì)被檢樣品進(jìn)行預(yù)處理;二、包括目標(biāo)靶基因數(shù)據(jù)庫(kù)的建立;生物信息學(xué)的分析比較;

基因組多態(tài)性的分型處理和簡(jiǎn)并堿基的運(yùn)用,獲得各種靶基因的特異性引物兩對(duì),分別與靶基因中的六個(gè)

獨(dú)立區(qū)域序列特異性匹配;三、進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng);四、分析判斷結(jié)果。該方法的優(yōu)點(diǎn):不需特殊試劑與

設(shè)備;高特異性;.靈敏度高;鑒定簡(jiǎn)便;用途廣: 可用于食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域的質(zhì)量控制和環(huán)境、

水質(zhì)等監(jiān)測(cè);用于醫(yī)學(xué)臨床診斷,用于代謝性疾病和遺傳疾病的基因診斷。

核酸試劑盒

RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應(yīng)溫度在37°C左右。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成，對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中，由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非?？?/span>，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。RPA擴(kuò)增的基礎(chǔ)體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴(kuò)增所需的所有試劑，我們只要準(zhǔn)備好引物和模板就行。擴(kuò)增結(jié)果可以通過(guò)凝膠電泳進(jìn)行終點(diǎn)檢測(cè)，產(chǎn)物純化后可用于下游研究。

在這個(gè)基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針，就可以實(shí)現(xiàn)多樣化的RPA應(yīng)用。舉例來(lái)說(shuō)，TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術(shù)和核酸外切酶III，能實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過(guò)反應(yīng)終點(diǎn)的擴(kuò)增子總量有所減少，適合獲得強(qiáng)熒光信號(hào)進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析，不適合終點(diǎn)檢測(cè)(比如跑膠)。將exo探針技術(shù)、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來(lái)，可以一步實(shí)現(xiàn)RNA模板的實(shí)時(shí)擴(kuò)增。