反相色譜分離后，如何快速?gòu)牧鲃?dòng)相中得到產(chǎn)品？

可以考慮先在低溫下，減壓旋蒸除去其中的有機(jī)的溶劑，然后用萃取的方法把產(chǎn)品萃取出來(lái)，然后再低溫再旋蒸，這樣，就可以不將溫度升得很高而得到產(chǎn)品。如果要直接蒸掉流動(dòng)相，水泵的真空度要注意（要檢查氣密性），否則蒸水會(huì)很慢。一般比較好的泵在60～70度即可蒸掉水，如果泵的真空度不好，可能需要80～90度才行，這樣容易暴沸導(dǎo)致樣品損失。溫度太高可能引起物質(zhì)變性。

制備色譜的填充

填料是工業(yè)制備色譜的血脈，填料的選擇和利用是非常關(guān)鍵的，目前已有越來(lái)越多的產(chǎn)品應(yīng)用到IPC中。填料的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)決定了色譜的分離性能和動(dòng)力學(xué)性能。應(yīng)用于大規(guī)模工業(yè)化制備色譜中的填料具有如下特殊的要求?！　?

1、機(jī)械強(qiáng)度高：填料需要承受很大的機(jī)械壓力，因?yàn)樘盍显贗PC使用中，需要經(jīng)常裝卸，機(jī)械性能差的填料經(jīng)受不住反復(fù)填充，它們易破碎，產(chǎn)生細(xì)顆粒，降低柱滲透性，甚至堵塞濾片，造成流速分布不均勻，影響分離產(chǎn)物的純度，在系統(tǒng)中產(chǎn)生極高的柱壓而無(wú)法繼續(xù)使用引?！　?

2、負(fù)載量大：在IPC中，填料的負(fù)載量越大，則單位體質(zhì)量填料可處理的原料量就可增加，因而提高了產(chǎn)率。選擇合適孔徑及孔徑分布的填料是獲得高負(fù)載量的一個(gè)關(guān)鍵因素。　　

3、可大量供應(yīng)，批間的重現(xiàn)性好：制備色譜工藝過(guò)程要擴(kuò)大，必須有可靠的供貨源提供大量填料，否則無(wú)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。填料各批量之間的化學(xué)和機(jī)械穩(wěn)定性、孔結(jié)構(gòu)及可重復(fù)的比表面積等必須具有高度的重現(xiàn)性，否則難以保證長(zhǎng)期、持續(xù)、穩(wěn)定的分離與純化生產(chǎn)工藝?！　?

4、合適的顆粒大小和窄的粒度分布范圍：細(xì)顆?？稍黾铀鍞?shù)及分辨率，但同時(shí)引起裝柱困難，需要更高的操作壓力。

工業(yè)制備色譜

工業(yè)色譜又稱制備色譜。利少{J組分的差速遷移而實(shí)現(xiàn)I.業(yè)規(guī)?；旌衔锓蛛x的方法它包括一個(gè)流動(dòng)相(被分離的氣相或液相)和一個(gè)固定相。兩相在色譜柱r}，進(jìn)行接觸，在色譜柱‘l，流動(dòng)相沿固定相流動(dòng)，由」幾混合物中各組分被固定相滯流程度不同，它們隨流動(dòng)相移動(dòng)的速度就不同，因而可使各組分.4.相分離。根據(jù)流動(dòng)相的不}.可，可分為}L相色譜與液相色譜兩類。根據(jù)固定相的類型，可分為吸附色譜、分配色iH離子交換色譜、親和色潛‘排I}}L色譜五類。上業(yè)色譜可分離選擇性系數(shù)非常接近的組分，它適用于熱敏N}物質(zhì)的分離，對(duì)制備高純物質(zhì)特別有效

蛋白質(zhì)的特點(diǎn)使得其分離過(guò)程與傳統(tǒng)化工分離過(guò)程有著極為不同的特點(diǎn):(1)分離對(duì)象是具有特定的生物活性的生物大分子產(chǎn)品，分離過(guò)程設(shè)計(jì)中不恰當(dāng)?shù)奈锢砗突瘜W(xué)環(huán)境等(如溫度、PH值、緩沖液選擇、、攪拌和剪切力等)皆有可能引起其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而使之失活;(2)由于發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)液或勻漿液中，我們所需要的目標(biāo)產(chǎn)物往往存在于含有許多性質(zhì)十分相似的雜質(zhì)的稀溶液中，如何從這樣一種復(fù)雜的稀溶液中經(jīng)濟(jì)有效地提取產(chǎn)物是生物分離技術(shù)面臨的重大課題;(3)從衛(wèi)生和安全角度出發(fā)，對(duì)于用基因工程產(chǎn)品，有著極高的純度和同一性要求，對(duì)其中的有害雜質(zhì)去除率要求極高，對(duì)分離設(shè)備材質(zhì)和分離過(guò)程中引入的分離介質(zhì)也有著嚴(yán)格的限制。