加酶標(biāo):于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“ ”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

A.富含DNA酶的胰臟、、胸腺、淋巴等組織。B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。C.富含角質(zhì)蛋白的組織或堅(jiān)硬的組織(如骨骼)等。② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,溫和研磨30秒鐘。注)使用上述①-注)的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),請(qǐng)?jiān)诩尤隨olution A及RNase A1后,將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中。如果勻漿體積不足650 μl,請(qǐng)補(bǔ)充Solution A至650 μl,65℃保溫5分鐘。
【從全血中提取基因組DNA】① 取10~250 μl的全血(含抗凝劑)加入至Collection Tube中。② 加入500 μl的Solution A。③ 加入1 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘后,冰浴5分鐘。注) 人與動(dòng)物的抗凝全血的一次處理量為≤250 μl;禽類、兩棲類的抗凝全血的一次處理量為≤10 μl?!緩呐囵B(yǎng)細(xì)胞中提取基因組DNA】三.使用懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞時(shí):① 使用Collection Tube收集1×105~1.5×107的細(xì)胞懸浮液,5,000 rpm離心5分鐘,棄上清(細(xì)胞培養(yǎng)液)。② 加入150 μl的滅菌蒸餾水或PBS懸浮細(xì)胞。③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。

將試劑完全倒入吸收盒內(nèi),蓋上盒蓋并輕輕搖動(dòng),搖勻后靜置10分鐘。與色卡比色,讀出被測(cè)空間(或家具)內(nèi)每立方米空氣中甲醛的濃度值。用甲醛檢測(cè)盒做檢測(cè)時(shí),要把檢測(cè)液放入一個(gè)容器,當(dāng)空氣流經(jīng)檢測(cè)液表面,就把甲醛完全吸收。這樣就等于把檢測(cè)液放入復(fù)雜的情況中檢測(cè),沒有任何一個(gè)檢測(cè)盒可以保證在單位時(shí)間內(nèi)流經(jīng)檢測(cè)液表面的空氣流量。這樣其受溫度、濕度、氣壓、檢測(cè)液表面積和空氣流速影響極大,從而造成檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤極大。