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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補(bǔ)發(fā)生共價(jià)鍵結(jié)合,能形成互補(bǔ)雜合雙鏈,而進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)。
RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂,在3個(gè)以上的不對(duì)稱位置作標(biāo)記。該技術(shù)是指運(yùn)用cRNA或寡核苷酸等探針檢測(cè)細(xì)胞和組織內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是:在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對(duì)原則,與待測(cè)細(xì)胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。組織切片與預(yù)處理冰凍切片:新鮮組織也可在取材后,直接置入液氮中迅速驟冷,冷凍切片后,4%多聚甲醛固定5~10min,也可保存在-70℃中待用。
基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象(即維持其原位)的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。2mol/LHCl處理載玻片,用蛋白酶K消化,然后用不同濃度的乙醇脫水。
原位雜交:在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種技術(shù)。陽(yáng)性對(duì)照用已知含靶序列的組織切片與待檢標(biāo)本同樣處理,結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性,稱陽(yáng)性對(duì)照。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結(jié)合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點(diǎn),應(yīng)用帶有標(biāo)記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸(RNA或DNA)片段進(jìn)行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。與病理學(xué)檢查結(jié)果比較,FISH檢測(cè)的特異性為100%,敏感性為87%。
利用核酸雜交技術(shù)進(jìn)行定性或定量分析的方法是將一種核酸單鏈用同位素或熒光物質(zhì)標(biāo)記,制成探針(見核酸分子探針),再與另一種核酸單鏈雜交核酸分子雜交有液相和固相兩種方法。尤其當(dāng)待檢標(biāo)本為陰性時(shí),陽(yáng)性對(duì)照片呈陽(yáng)性反應(yīng)可排除待檢標(biāo)本假陰性的可能。液相法的核酸單鏈分子都在溶液中,通過分子運(yùn)動(dòng)進(jìn)行雜交固相法是將一種核酸單鏈固定在不溶性的介質(zhì)上。另一種核酸單鏈在溶液中與固定的核酸分子進(jìn)行雜交。常用的固相介質(zhì)有纖維膜、尼龍纖維膜、瓊脂糖和聚酰胺凝膠等。 [