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顯微鏡成像原理
以下以光學(xué)顯微鏡為例:
光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡、載物臺(tái)和反光鏡組成。目鏡和物鏡都是凸透鏡,焦距不同。物鏡的凸透鏡焦距小于目鏡的凸透鏡的焦距。物鏡相當(dāng)于投影儀的鏡頭,物體通過物鏡成倒立、放大的實(shí)像。目鏡相當(dāng)于普通的放大鏡,該實(shí)像又通過目鏡成正立、放大的虛像。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。如果有較重的霉點(diǎn)或霉斑無法除去時(shí),可用棉簽蘸水潤濕后粘上碳酸鈣粉(含量為99%以上)進(jìn)行擦拭。反光鏡用來反射,照亮被觀察的物體。反光鏡一般有兩個(gè)反射面:一個(gè)是平面鏡,在光線較強(qiáng)時(shí)使用;一個(gè)是凹面鏡,在光線較弱時(shí)使用,可匯聚光線。
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顯微鏡——接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié)
顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤孔中。觀察標(biāo)本時(shí),先使用低倍接物鏡,此時(shí),視野較大,標(biāo)本較易查出,但放大倍數(shù)較小(一般放大100倍),較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。顯微鏡——接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié)顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤孔中。高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。
蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養(yǎng)體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡。組織細(xì)胞內(nèi)的原蟲,則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準(zhǔn)確鑒定所見的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時(shí),則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。以下以電子顯微鏡為例電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理,用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡,使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。使用油鏡觀察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀察。
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顯微鏡在檢測(cè)上的作用
熒光顯微鏡除了具體傳統(tǒng)顯微鏡的明場(chǎng)觀察功能外,比如觀察培養(yǎng)皿里的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞,更主要的用途是作為熒光觀察的工具;利用相應(yīng)的熒光染料對(duì)進(jìn)行標(biāo)記,通過熒光顯微鏡觀察,就可以判斷是否與病毒細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合,在細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)熒光特征,就證明了病毒的存在,這是熒光的直接法觀察。此外還有間接法熒光觀察方法,該方法對(duì)操作人員的經(jīng)驗(yàn)要求比較高。在病毒實(shí)驗(yàn)中,斑點(diǎn)熒光檢測(cè)法應(yīng)用也是非常廣泛的,該方法是對(duì)二抗進(jìn)行相應(yīng)的熒光染料標(biāo)記,然后再利用熒光顯微鏡進(jìn)行檢測(cè),如果存在被病毒的細(xì)胞,就能形成對(duì)應(yīng)的熒光斑點(diǎn)。當(dāng)顯示屏上的圖像有切割的時(shí)候,就要考慮一下拉桿移動(dòng)有沒有到位。