ELISA試劑盒的操作方法——間接法

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1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.然后用DDW洗滌。

其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。

Elisa試劑盒原理及用途

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的米松（Dexamethasone，DEX），試劑盒由預包被偶聯(lián)抗原的酶標板、酶標記物、、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的米松藥品和酶標板上預包被偶聯(lián)抗原競爭抗米松藥類，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含米松藥品含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中米松藥品的殘留量。

Elisa試劑盒技術原理

(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標記。

(2). 結合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。

(3). 酶標記的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。

(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或起反應。再加入酶標記的抗原或，也通過反應而結合在固相載體上。

(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以反應為基礎，將抗原、的特異性反應與酶對底物的有效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。