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熒光分光光度計是紫外嗎
熒光分光光度計不是紫外,這是兩個不同的概念。
紫外分光光度計檢測物質環(huán)境的要求較低。其應用波長范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見光區(qū)。
熒光分光光度計檢測物質要求環(huán)境高,微量檢測,結果較準確,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。在溶液中,當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即IF=KC,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,對被測物質要求高。相比較,熒光光度計較準確。
淺析熒光光譜
無論分子初處于哪一個激發(fā)單重態(tài),通過內轉換及振動弛豫,均可返回到激發(fā)單重態(tài)的低振動能級,然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)的任一振動能級上,這時發(fā)射的光稱為熒光。由于振動弛豫和內轉換損失了部分能童,故熒光的波長總比激發(fā)光波長要長。發(fā)射熒光的過程為 秒。由于電子返回基態(tài)時可以停留在基態(tài)的任一振動能級上,因此得到的熒光譜線有時呈現幾個非??拷姆?。通過進一步振動弛豫,這些電子都很快地回到基態(tài)的低振動能級。
熒光光譜體系間跨越
是處于激發(fā)態(tài)分子的電子發(fā)生自旋反轉而使分子的多重性發(fā)生變化的過程。分子由激發(fā)單重態(tài)跨越到激發(fā)三重態(tài)后,熒光強度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時,體系間跨越為常見,原因是在髙原子序數的原子中,電子的自旋與軌道運動之間的相互作用較大,有利于電子自旋反轉的發(fā)生。另外,在溶液中存在氧分子等順磁性物質也容易發(fā)生體系間跨越,從而使熒光減弱。