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親和柱——親和層析原理
親和層析原理:利用生物分子之間的專一性識別性或特定的相互作用的分離技術(shù)稱為親和分離技術(shù)。在該技術(shù)中,親和分離過程是通過引入親和配基得以實現(xiàn)的。所謂親和配基,是指具有對生物分子專一識別性或特異相互作用的物質(zhì)。將親和配基固定在不同的介質(zhì)上,可得到不同的親合分離技術(shù),如固定在層析介質(zhì)上,達到專一性層析分離的技術(shù)稱為親和層析技術(shù)。將親和配基接在分離膜上,得到親和膜分離技術(shù)。
親和柱的特點及使用注意事項
特點:
?特異性強,柱容量大;
? 簡單,方便,安全,環(huán)保。
注意事項:
1、2-8℃保存,使用前需要回溫到室溫24-28℃,較佳溫度25℃。
2、復(fù)雜基質(zhì)如高蛋白、高油脂、酸性樣品可將提取液分兩次提取提高提取效果。
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親和柱和多功能凈化柱能不能重復(fù)使用? 復(fù)合型多親和柱是15版新藥典凈化柱,用適當(dāng)?shù)木彌_液和合適的保存方法,柱可以再生備用。而且有1mL和3mL兩種規(guī)格,其中3mL超大柱容量,性價比更高哦。對于總量檢測還可用多功能凈化柱,它雖然不像親和柱那么有特異性,但是操作方便快捷,30秒完成,主要是便宜,適用于液相中基質(zhì)相對簡單的樣品前處理或質(zhì)譜法樣品前處理。 多功能凈化柱是現(xiàn)行國標(biāo)凈化柱,液相液質(zhì)通用,適用于對各類樣品中(AFT),玉米赤霉烯酮(ZON),玉米赤霉烯醇,玉米赤霉醇(Zearalanol)的純化處理,是一種特殊的SPE柱子,以極性、非極性及離子交換等基團組成填充劑,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白質(zhì)類等雜質(zhì),不被吸附而直接通過,MFC的操作更為簡便,不需要進行活化、淋洗和洗脫操作只需要直接上樣,30秒鐘即可完成整個凈化過程,效果理想。
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親和層析的產(chǎn)生背景
殘留檢測的確證方法主要是儀器分析法,如LC-MS、GC-MS或HPLC,這些方法中因殘留組分量很小,檢測方法需要較高靈敏度和準(zhǔn)確性。樣品前處理是檢測技術(shù)的核心,傳統(tǒng)的樣品凈化技術(shù)主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基質(zhì)固相分散(MSPD)、超臨界萃取(SFE)等。但是這些凈化技術(shù)通常需要多個凈化步驟,缺乏選擇性,不但費時繁瑣、容易污染、損失樣本且會引起嚴(yán)重的本底干擾,降低結(jié)果的可靠性。因此建立有效的樣本凈化技術(shù)已成為痕量分析的主要問題。近20年,固相提取領(lǐng)域研究的不斷深入,推進了從分析物中選擇性萃取目標(biāo)產(chǎn)物為目的的新技術(shù)發(fā)展(Hennion等,2003)。